杂色鲍caspase-3基因的克隆及其在发育、弧菌感染、高温和缺氧应激中的表达分析

摘要

为探讨Caspase细胞凋亡通路在杂色鲍Haliotis diversicolor早期发育、免疫及应激过程中的作用,采用cDNA末端快速扩增法克隆出caspase-3基因的全长cDNA序列,并用定量PCR分析了caspase-3基因在各组织、早期发育及经感染副溶血弧菌、高温应激和缺氧应激处理后的表达情况。结果表明:caspase-3基因的cDNA全长为1192 bp,共编码252个氨基酸,该氨基酸序列具有高度保守的P20和P10活性位点;caspase-3基因在杂色鲍成体的各个组织中均有表达,其中血淋巴中的表达量显著高于其他组织(P<0.05);在早期发育阶段中受精卵和2细胞期的表达量最高(P<0.05);经副溶血弧菌感染后,血淋巴中caspase-3的表达量在12 h时显著上调(P<0.05);经高温应激处理后,血淋巴和肝胰腺中caspase-3基因的表达量在24 h时显著上调(P<0.05);经缺氧处理后,鳃组织中caspase-3基因的表达量在96 h时出现显著上调(P<0.05),而血淋巴中的表达量在4 h时显著上调(P<0.05)。研究表明,caspase-3基因在杂色鲍早期发育、免疫和应激中发挥着重要作用。