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免疫磁珠法体外促脐带血调节性T细胞增殖能力的研究

     

摘要

目的 分离人脐带血CD4+CD25+调节性T细胞(regulatory T cells,Tregs),通过扩增磁珠进行体外扩增培养并检测其功能.方法 利用分离磁珠分离人脐带血中的CD4+CD25+Tregs.将分离获得的CD4+CD25+Tregs与扩增磁珠共同培养.通过淋巴细胞分析实验观察脐血中淋巴细胞的含量,通过磁珠分选观察脐血中调节性T细胞含量,并通过PI染色观察分选到的细胞的活力.通过不同的培养条件(磁珠组、对照组)观察免疫磁珠对于Tregs的扩增能力.结果 脐血中CD4+细胞中CD4+CD25+Tregs含量约为4.5%,CD4+CD25–细胞含量为95.5%.经过分离磁珠分选后可见Tregs被有效富集,PI染色检测细胞活性无损失,含量约为81%.与人T细胞扩增磁珠共培养后,可见Tregs被有效扩增.结论 免疫分离磁珠能够有效的富集脐血单个核中的Tregs,且无明显的损伤.通过实验可见T细胞扩增磁珠确实能够很有效的在体外扩增调节性T细胞,但其生物学能力的评估仍需要进一步的研究证实.

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