microRNA-18a通过PPARα/γ信号通路上调慢性乙型肝炎患者调节性免疫功能

摘要

cqvip:目的分析microRNA-18a(miRNA-18a)通过过氧化物酶体增殖物激活受体α/γ(PPARα/γ)信号通路对慢性乙型肝炎患者调节性免疫功能的影响。方法纳入空军特色医学中心(原中国人民解放军空军总医院)2017年4月-2018年10月98例慢性乙型肝炎患者和96例非乙型肝炎患者分别作为试验组和对照组。实时荧光定量聚合酶链反应检测2组患者血清中的miRNA-18a mRNA的相对表达量;流式细胞技术检测人外周血单个核细胞中miRNA-18a的表达;酶联免疫吸附试验检测miRNA-18a对CD4+CD25+调节性T淋巴细胞(Treg)相关细胞因子分泌水平的影响;Western Blot检测2组患者PPARα/γ信号通路相关蛋白表达。再将PBMC分为si-miRNA-18a抑制组(转染miRNA-18a抑制剂)和si-miRNA-18a正常对照组(转染miRNA-18a质粒),用流式细胞技术检测抑制miRNA-18a表达对CD4+CD25+Treg细胞频率的影响,Western Blot检测2组PPARα/γ信号通路相关蛋白的表达。正态分布的计量资料2组间比较采用t检验。Pearson相关分析检验miRNA-18a表达与PPARα/γ信号通路相关蛋白的相关性。结果试验组miRNA-18a mRNA表达水平在血清和肝组织中较对照组均显著上调(t值分别为9.634、9.863,P值均<0.01)。试验组CD4+CD25+Treg细胞频率较对照组显著上调(t=9.854,P<0.01)。试验组的IFNγ分泌水平和IL-9分泌水平较对照组均明显上调(t值分别为8.235,8.382,P值均<0.05)。试验组的PPARα和PPARγ表达水平较对照组均明显上调(t值分别为4.229、3.545,P值均<0.05)。si-miRNA-18a抑制组外周血CD4+CD25+Treg细胞占CD4+T淋巴细胞的比例明显低于si-miRNA-18a正常对照组(t=3.968,P<0.01)。si-miRNA-18a抑制组的PPARα和PPARγ表达水平均明显较si-miRNA-18a正常对照组低(t值分别为5.023、4.983,P值均<0.05)。miRNA-18a与PPARα/γ信号通路中的PPARα及PPARγ蛋白表达水平均呈正相关(r值分别为0.701、0.682,P值均<0.05)。结论miRNA-18a可能通过激活PPARα/γ信号通路对慢性乙型肝炎患者调节性免疫功能产生影响,使其免疫功能相关细胞表面因子频率和细胞因子分泌水平上调。