长链非编码RNAβ分泌酶1反义转录物在七氟醚诱发老年大鼠认知功能下降中的作用

摘要

目的 探讨长链非编码RNA(lncRNA)β分泌酶1反义转录物(BACE1?AS)在七氟醚诱发老年大鼠认知功能下降中的作用.方法 SPF级健康雄性SD老年大鼠64只,18月龄,体重480～580 g.采用随机数字表法分为四组:对照组(C组)、七氟醚组(S组)、七氟醚+阴性对照质粒组(SN组)和七氟醚+BACE1?AS抑制剂(siRNA?BACE1?AS)组(ST组),每组16只.SN组和ST组分别侧脑室注射阴性对照质粒和siRNA?BACE1?AS,C组和S组注射等体积PBS溶液,注射后1 d C组吸入30％氧气6 h,S组、SN组和ST组吸入3.6％七氟醚与30％氧气的混合气体6 h.气体吸入后1 d,采用水迷宫实验测实验第1～5天逃避潜伏期和实验第6天穿越平台次数.水迷宫实验结束后1h内处死大鼠,取海马组织,采用ELISA法检测海马组织TNF?α、IL?1β、丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)浓度,可见分光光度计法检测海马组织caspase?3活性,Western blot法检测海马组织Bax、Bcl?2和BACE1蛋白含量,RT?qPCR法检测海马组织lncRNA BACE1?AS、miR?124和BACE1 mRNA表达量,TUNEL法测定海马组织神经细胞凋亡百分比,苏木素伊红染色法观察海马组织病理结构.结果 与C组比较,S组、SN组和ST组水迷宫实验第3～5天逃避潜伏期明显延长(P<0.05),实验第6天穿越平台次数明显减少(P<0.05),海马组织TNF?α、IL?1β和MDA浓度、BACE1和Bax蛋白含量、lncRNA BACE1?AS和BACE1 mRNA表达量、凋亡细胞百分比明显升高(P<0.05),SOD浓度、Bcl?2蛋白含量、miR?124 mRNA表达量明显降低(P<0.05),caspase?3活性明显增强(P<0.05).与S组比较,ST组水迷宫实验第3～5天逃避潜伏期明显缩短(P<0.05),实验第6天穿越平台次数明显增多(P<0.05),海马组织TNF?α、IL?1β和MDA浓度、BACE1和Bax蛋白含量、lncRNA BACE1?AS和BACE1 mRNA表达量、凋亡细胞百分比明显降低(P<0.05),SOD浓度、Bcl?2蛋白含量、miR?124 mRNA表达量明显升高(P<0.05),caspase?3活性明显减弱(P<0.05).S组和SN组上述指标差异均无统计学意义.结论 长链非编码RNAβ分泌酶1反义转录物参与七氟醚诱导老年大鼠认知功能下降,其机制与神经细胞炎症、氧化应激损伤、调控miR?124和BACE1表达和促进细胞凋亡有关.