JNK信号通路在丙泊酚减轻人脐静脉内皮细胞氧化应激损伤中的作用

摘要

目的 探讨不同浓度丙泊酚预处理对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)氧化应激损伤的作用,探讨其与c-Jun氨基端激酶(JNK)信号通路的关系.方法 体外培养的HUVECs分为八组:对照组(C1组)细胞行常规培养;DMSO对照组(C2组)细胞的培养基中加入DMSO(终浓度0.05％);丙泊酚组(P组)细胞的培养基中加入丙泊酚(终浓度50 μmol/L)处理4 h;H2O2处理组(H组)细胞的培养基中加入H2 O2(终浓度400 μmol/L)处理4h;超低浓度丙泊酚组(HP1组)的细胞以1μmol/L丙泊酚预处理HUVECs 30 min后加入H2O2 400μmol/L处理4h;余在HP1组基础上增加预处理丙泊酚浓度分别为5μmol/L(HP5组)、25μmol/L(HP25组)和50μmol/L(HP50组).各组细胞培养后,用CCK-8法测定细胞活力,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,Western blot法检测HUVECs磷酸化JNK(p-JNK)、Bcl-2及Bax蛋白表达水平.结果 与C1组比较,H组和HP1、HP5、HP25、HP50组细胞活力明显降低,细胞凋亡率明显升高,p-JNK蛋白表达以及Bax蛋白表达明显升高,而Bcl-2/Bax比值明显降低(P＜0.05); HP1组和HP5组p-JNK/JNK比值明显升高,Bcl-2蛋白表达明显下降(P＜0.05).与H组比较,HP25组和HP50组的细胞活力明显升高,HP5组、HP25组和HP50组细胞凋亡率明显降低,p-JNK/JNK和Bax表达明显下调,Bcl-2和Bcl-2/Bax比值明显升高(P＜0.05).结论 25 μmol/L和50μmol/L浓度的丙泊酚预处理可减轻氧化应激对HUVECs的损伤,其机制与抑制JNK信号通路有关.