藁本内酯抗药物诱导的斑马鱼血栓的作用研究

摘要

目的 旨在采用苯肼(phenyl hydrazine,PH)和盐酸肾上腺素(adrenaline hydrochlo-ride,AH)诱导稳定的斑马鱼血栓模型,并研究藁本内酯(ligustilide,LIG)的抗血栓作用.方法 采用正交实验设计方法优化PH及AH诱导斑马鱼血栓模型建立的条件,包括诱导剂浓度、诱导时间、染色时间、鱼龄4个方面;将斑马鱼随机分为空白对照组、诱导剂组(PH/AH处理)、阳性对照组(PH/AH+阿司匹林处理)和给药组(PH/AH+20/40/60μmol/L LIG)进行给药处理.对于实验结果的判断,主要通过在进行给药处理后,用邻联茴香胺染色,并用Image-Pro Plus 6.0计算尾部染色面积的方法,定量分析血栓形成情况.结果 苯肼的最优诱导条件为浓度0.75μmol/L,诱导时间24 h,染色时间35 min,诱导时鱼龄2 dpf(days post-fertilization);盐酸肾上腺素的最优诱导条件为浓度15μmol/L,诱导时间16 h,染色时间30 min,诱导时鱼龄4 dpf.LIG对斑马鱼血栓形成有一定的抑制作用,最佳浓度在20～40μmol/L范围时,可以从尾静脉处观察、检测到血栓生成显著减少.结论 LIG在斑马鱼体内具有一定的抗血栓作用,最佳浓度为20～40μmol/L.