乳酸脱氢酶A（ldha）基因的克隆与原核表达

摘要

乳酸脱氢酶是一种糖酵解酶,在厌氧条件下能催化丙酮酸生成乳酸;当动物体内缺乏葡萄糖时,还可氧化乳酸生成丙酮酸并经葡萄糖异生途径转变为葡萄糖。通过反转录PCR获得了Hela细胞中的ldha基因,并将它克隆到pET28a（＋）载体上,获得重组表达载体pET28a（＋）-ldha。重组质粒通过转化法转入宿主E.coli BL21（DE3）溶源菌中。SDS-PAGE分析表明,在1.0 mmol·L-1异丙基硫代-β-D半乳糖苷（IPTG）的诱导下,重组子成功表达了一条分子质量约为36 kDa的目标蛋白。