AMPA受体增强剂CX546减轻氯胺酮麻醉后神经元活动损伤的作用机制研究

摘要

目的 探讨AMPA受体增强剂CX546减轻氯胺酮麻醉后神经元活动损伤的作用机制.方法 将36只小鼠随机分成四组并进行处理,分别为:对照组、麻醉组,氯胺酮+ 10 mg/kg CX546组和氯胺酮+20 mg/kg CX546组.通过自主活动能力测试和强迫游泳实验检测氯胺酮及CX546对小鼠神经行为的影响;分离小鼠原代皮质神经元细胞并进行氯胺酮、CX546和Wnt信号通路抑制剂ICG-001处理,采用Western blot和Real-time PCR检测β-catenin及细胞凋亡相关因子的表达,通过TUNEL实验检测皮质神经元细胞的凋亡率.结果 与对照组相比,麻醉组小鼠的悬浮时间更少(P＜0.01);注射CX546后,悬浮时间明显延长(P＜0.01),且氯胺酮+ 20 mg/kg CX546组比氯胺酮+10 mg/kg CX546组更为明显(P＜0.05).5～30 min内,麻醉组小鼠的自主活动量迅速升高;30～60 min内,各组小鼠的自主活动量都逐渐下降,氯胺酮+20 mg/kg CX546组比氯胺酮+ 10 mg/kg CX546组下降更为明显.氯胺酮导致小鼠神经元细胞β-catenin和Bcl-2表达下降,Bax和caspase 3表达上升,细胞凋亡率增加(P＜0.01);CX546提高受氯胺酮抑制的β-catenin的表达,并阻碍氯胺酮对细胞的促凋亡作用,且1μmol/L浓度的CX546效果较0.5μmol/L的更显著(P＜0.01).与未加ICG-001的氯胺酮处理组相比,ICG-001和氯胺酮处理神经元细胞导致3-catenin和Bcl-2表达下降,Bax和caspase 3表达上升,细胞凋亡率升高(P＜0.01);CX546能让ICG-001和氯胺酮处理的神经元细胞中Bcl-2表达上调,Bax和caspase 3表达下降,但对β-catenin表达及细胞凋亡率无明显改变.结论 CX546保护氯胺酮麻醉后神经元细胞损伤的作用机制,即通过激活Wnt/β-catenin信号从而抑制神经元细胞的凋亡,为CX546用于麻醉后神经元损伤的保护提供新的依据.