shRNA沉默VEGF-C基因对大肠癌淋巴管生成和淋巴结转移的影响

摘要

目的观察RNA干扰（RNA interference,RNAi）技术抑制大肠癌细胞株Lovo中VEGF-C基因的表达,探讨抑制shRNA-VEGF-C对人大肠癌细胞Lovo生物学特性的影响。方法构建表达ShRNA-VEGF-C重组质粒转染Lovo细胞,72 h后用实时RT-PCR（real-time polymerase chain recation）检测VEGF-C mRNA表达;建立Lovo细胞皮下移植瘤裸鼠模型,注射shRNA-VEGF-C,动态观察肿瘤体积并于4周后处死裸鼠称取瘤重、计算局部淋巴结转移率,免疫组化法检测大肠癌组织微淋巴管密度（microlymphatic density,MLD）。结果转染shRNA-VEGF-C后,Lovo细胞VEGF-C mRNA表达下调;体内实验结果显示,4周后shRNA-VEGF-C组移植瘤体积[（324.9±64.8）mm~3]明显小于空质粒组[（553.5±90.1）mm~3]和生理盐水对照组[（570.1±85.4）mm~3]（P＜0.01）;shRNA-VEGF-C组瘤重[（3.01±0.55）g]也低于空质粒组[（4.65±0.65）g]和生理盐水对照组[（4.75±0.55）g]（P＜0.01）;shRNA-VEGF-C组微淋巴管密度LMVD（15.5±6.90）明显低于HK组（24.18±6.45）和生理盐水对照组（29.59±8.21）（P＜0.01）;shRNA-VEGF-C组局部淋巴结转移率（30.1%）明显低于空质粒组（50.2%）和生理盐水组（53.1%）。结论 shRNA-VEGF-C可影响VEGF-C诱导的淋巴管生成并抑制大肠癌淋巴结转移。