野艾蒿挥发油诱导HeLa细胞凋亡与坏死

摘要

目的:研究野艾蒿挥发油对HeLa细胞凋亡与坏死的影响。方法:MTT法检测细胞活力,显微镜观察细胞形态与结构的变化,DNA Ladder、流式细胞仪检测细胞凋亡,彗星电泳检测DNA损伤,Western blot检测Caspase-3和多聚ADP核糖聚合酶(PARP)表达。结果:MTT法检测结果显示野艾蒿挥发油对HeLa细胞的增殖有明显的抑制作用,呈剂量依赖性。野艾蒿挥发油处理HeLa细胞24 h后,100、200μg/mL实验组细胞体积缩小,核固缩,染色质凝集、片段化,表现为典型的凋亡特征;400μg/mL实验组细胞膜破裂、内含物外泄,表明细胞已坏死。此外,DNA Ladder结果显示,各实验组均有梯状条带;流式细胞仪检测结果也显示,各实验组均有凋亡峰。野艾蒿挥发油处理HeLa细胞6 h后,100μg/mL实验组彗星电泳中出现彗尾。Western-blotting结果显示,野艾蒿挥发油能够诱导HeLa细胞中Caspase-3蛋白表达量降低,同时PARP发生剪切、失活。结论:野艾蒿挥发油具有抑制HeLa细胞增殖的作用。低浓度野艾蒿挥发油诱导细胞凋亡,高浓度野艾蒿挥发油引起细胞坏死,其凋亡机制是依赖Caspase-3介导的PARP凋亡信号转导途径。