白花香莲解毒颗粒调控AMPK/mTOR通路抑制肝星状细胞自噬和活化的作用机制研究

摘要

目的:探究白花香莲解毒颗粒调控AMPK/mTOR通路抑制肝星状细胞(HSCs)自噬和活化的作用机制。方法:SPF级SD大鼠随机分为正常对照组、肝纤维化模型组及白花香莲解毒颗粒低(30 g/kg)、中(60 g/kg)、高(120 g/kg)剂量组,每组10只;Westen Blot检测α-SMA蛋白表达及LC3Ⅱ/LC3Ⅰ水平;HE染色观察大鼠肝组织病理学变化;Masson染色观察大鼠肝组织胶原纤维;免疫组化观察大鼠肝组织中α-SMA表达。分离培养大鼠原代HSCs,分为对照组、白花香莲解毒颗粒组、白花香莲解毒颗粒+雷帕霉素组、白花香莲解毒颗粒+3-MA组;Westen Blot检测α-SMA、CollagenⅠ、CollagenⅢ蛋白表达及p-AMPK/AMPK、p-mTOR/mTOR、p-P70S6K/P70S6K、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ水平;MTT检测细胞活力。结果:各剂量白花香莲解毒颗粒可显著降低大鼠肝组织α-SMA蛋白表达及LC3Ⅱ/LC3Ⅰ水平(P<0.05),减少受损肝细胞数量、炎细胞浸润及纤维间隔区域面积,减轻胶原纤维增生,降低α-SMA表达。白花香莲解毒颗粒可升高大鼠原代HSCs中p-AMPK/AMPK、p-mTOR/mTOR、p-P70S6K/P70S6K水平和细胞活力,降低α-SMA、CollagenⅠ、CollagenⅢ蛋白表达及LC3Ⅱ/LC3Ⅰ水平(P<0.05);雷帕霉素可减弱其作用,而3-MA可增强其作用。结论:白花香莲解毒颗粒可通过活化AMPK/mTOR通路抑制自噬,进而拮抗HSCs活化。