抗P21蛋白特定位点单克隆抗体的制备及鉴定

摘要

用相当于ras p21蛋白质氨基酸序列56～64位的合成肽与血蓝蛋白偶联作为抗原,利用B淋巴细胞杂交瘤技术成功地得到了分泌抗P21蛋白的单克隆抗体杂交瘤系SE11及EB2411。其抗体亚型分别为IgG3及IgG2a。本文着重研究了EB2411单抗与人肿瘤细胞的反应性。免疫组化技术检测结果表明,EB2411单抗与人肝癌7402、乳腺癌MCF、胃癌823、肺腺癌A2及肺鳞癌78等细胞系均呈阳性反应。肺癌、肝癌及结肠癌亦呈现不同程度的阳性反应,而与结肠息肉及肺癌癌旁的正常肺泡的反应为阴性。用放射免疫沉淀-SDS-PAGE技术检测Ha-ras12val转化的细胞HR-1,证明EB2411单抗与p21蛋白反应。