反复自然流产患者滋养细胞凋亡相关基因表达谱

摘要

采用全基因组表达芯片技术研究反复自然流产(recurrent spontaneous abortion,RSA)患者与正常早孕妇女滋养细胞(trophoblast,TB)中凋亡相关基因表达差异,探寻RSA发病机制。收集正常妊娠和RSA妇女胚胎绒毛,分离滋养层细胞并进行原代培养,提取细胞总RNA,逆转录为双链cDNA后制备生物素标记的cRNA探针,探针与Affymetrix U133 plus2.0基因芯片杂交后,经Affymetrix GeneChip Scanner3000读取荧光图象、GeneChip Operating software(GCOS)软件分析后,将数据导入GeneSpringGX软件分析,获得了差异表达(≥2)凋亡相关基因75个,其中表达上调23个,下调52个。层次聚类结果显示,凋亡相关基因在两类细胞中表现出明显的差异:RSA患者分离的TB细胞中,促凋亡基因多表现为表达上调,而凋亡抑制基因则多表现为表达下调。差异表达的凋亡相关基因涉及两条重要的信号转导通路,即Foxo家族信号通路和IL6介导的信号转导通路。这些研究结果为不明原因反复自然流产的病因研究打下了实验基础。