脾气虚证与肾气虚证大鼠小肠组织cAMP-PKA信号转导通路变化的比较研究

摘要

目的 比较脾气虚证和肾气虚证大鼠回肠组织环磷酸腺苷-蛋白激酶(cAMP-PKA)信号转导通路的变化.方法 将24只雄性SD大鼠随机分为正常组、脾气虚组、肾气虚组.脾气虚采用饱食1d、禁食2d、3d为1个循环,并每日游泳至力竭,连续15d;肾气虚采用腹腔注射卡那霉素,用药量250 mg/kg,分2次注射,用药14 d.造模后采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测各组大鼠回肠组织环磷酸腺苷(cAMP)活性,实时荧光定量PCR法和蛋白质印迹法(Western blot)检测蛋白激酶(PKA)、糖原磷酸化酶(GP)、磷酸化酶激酶(PHK)mRNA和蛋白的表达.结果 与正常组比较,脾气虚组和肾气虚组大鼠的回肠组织cAMP含量均明显降低(P<0.05或P<0.01),在脾气虚组与肾气虚组之间,脾气虚组cAMP含量降低更多(P<0.01).与正常组比较,脾气虚组大鼠回肠组织PKA mRNA和蛋白的表达明显减弱(P<0.01),肾气虚组仅PKA蛋白表达有所下降(P<0.05).与正常组比较,脾气虚组大鼠回肠组织PHK mRNA和蛋白的表达有明显减弱(P<0.01),肾气虚组仅PHK蛋白表达有减弱(P<0.05);并且在脾气虚组与肾气虚组之间,肾气虚组PHK mRNA表达高于脾气虚组(P<0.05).与正常组比较,脾气虚组大鼠回肠组织GP mRNA和蛋白的表达有显著减弱(P<0.01),肾气虚组大鼠回肠组织GP mRNA表达下降(P<0.01);并且在脾气虚组与肾气虚组之间,肾气虚组GP mRNA和蛋白表达高于脾气虚组(P<0.01).结论 脾气虚证与肾气虚证大鼠回肠组织cAMP-PKA信号传导通路的变化存在差异,特别是在cAMP含量上,与正常组相比,由于脾气虚组较肾气虚组cAMP含量降低更多,推断脾气虚证出现乏力等低能量表现重于肾气虚组.