山羊基因组DNA RAMP-PCR反应体系的建立

摘要

以山羊基因组DNA为材料,研究了MgCl2浓度、引物浓度、dNTP浓度、模板DNA用量、TaqDNA聚合酶用量对RAMP-PCR反应的影响.建立了一套适合山羊的最佳RAMP反应体系.反应总体积为25μL,MgCl2浓度2.0 mmol/L、引物为0.4 mmol/L、dNTP浓度为0.2 mmol/L、模板DNA为25 ng,TaqDNA聚合酶为1U.PCR反应程序为:94℃ 5 min;94℃ 30 s,40℃ 45s,72℃ 90s,30 Cycles;72℃ 10 min.