猪CFL2b/荧光蛋白融合基因在小鼠成肌细胞中的表达与定位

摘要

[目的]了解猪CFL2b基因在成肌细胞中的表达与定位.[方法]用RT-PCR方法扩增得到猪CFL2b基因,连接到T载体上,双酶切后通过定向克隆将其与真核表达载体pEGFP-N1的绿色荧光蛋白基因融合,构建CFL2b-荧光蛋白融合基因表达载体.然后经真核表达质粒脂质体介导,导入C2C12细胞系.[结果]荧光显微镜观察显示:在空白载体pEGFP-N1转染的C2C12细胞中荧光布满整个细胞,而在转染阳性载体pEGFP-N1-CFL2b 的C2C12细胞中荧光主要聚集在细胞质的肌动蛋白丝.表明转染的C2C12细胞系能够高效表达猪CFL2b蛋白,猪CFL2b基因表达的蛋白定位于细胞质中.[结论]该研究为CFL2b基因的功能及该基因与猪肉质性状的相关性的研究奠定了基础.