C2C12细胞

摘要： 目的:探讨人参组培不定根蛋白(GARP)对小鼠的抗疲劳作用,阐明其作用机制,为开发利用人参组培不定根资源提供实验依据。方法:40只昆明种清洁级小鼠采用负重游泳实验建立疲劳动物模型,随机分为对照组,低、中和高剂量(0.25、0.50和1.00 g·kg^(-1))GARP组,每组10只。通过力竭游泳实验记录各组小鼠游泳时间,游泳实验后处死小鼠,采用分光光度法检测各组小鼠血清中血乳酸(BLA)和血尿素氮(BUN)水平,采用分光光度法检测各组小鼠肝组织中谷胱甘肽(GSH)水平、超氧化物歧化酶(SOD)活性和肝糖原水平,采用分光光度法检测各组小鼠肌肉组织中肌糖原水平。小鼠成肌细胞(C2C12细胞)分为对照组和不同剂量(5、10和20 mg·L^(-1))GARP组,采用分光光度法检测各组细胞中GSH水平、SOD活性和糖原水平,苯酚硫酸法检测各组细胞葡萄糖摄取能力,Western blotting法检测各组细胞中腺苷酸激活蛋白激酶(AMPK)的磷酸化水平[磷酸化AMPK(p-AMPK)/AMPK比值]和葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)蛋白表达水平。结果:与对照组比较,中和高剂量GARP组小鼠游泳时间明显延长(P<0.05或P<0.01),血清中BLA和BUN水平明显降低(P<0.05或P<0.01);不同剂量GARP组小鼠肝组织中GSH水平和SOD活性明显升高(P<0.05或P<0.01),肝糖原和肌糖原水平均明显升高(P<0.05或P<0.01)。与对照组比较,不同剂量GARP组细胞中GSH水平、SOD活性和糖原水平明显升高(P<0.05或P<0.01),细胞的葡萄糖摄取能力明显增强(P<0.05或P<0.01),p-AMPK/AMPK比值和GLUT4蛋白表达水平明显升高(P<0.05或P<0.01)。结论:GARP具有抗疲劳作用,其机制可能是通过激活AMPK/GLUT4信号通路促进糖摄取实现的。

摘要： 目的 组蛋白甲基化修饰作为组蛋白密码的重要组成部分在表观遗传学研究中占有重要地位。本文旨在探讨组蛋白甲基化酶SUV39H1过表达对骨形态发生蛋白2(bone morphogenetic protein 2,BMP2)诱导的C2C12细胞成骨分化的影响。方法 利用SUV39H1慢病毒感染C2C12细胞构建SUV39H1过表达稳转株。然后利用100 ng/mL的BMP2成骨诱导液对SUV39H1过表达稳转株成骨诱导7 d,随后进行碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, ALP)染色和茜素红染色检测成骨分化和矿化相关指标,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、细胞免疫荧光、Western blot检测成骨相关蛋白表达。结果 ALP和茜素红染色显示,与过表达GFP对照组比较,SUV39H1过表达会抑制C2C12细胞早期和晚期成骨分化和矿化程度,qRT-PCR显示,与过表达GFP对照组比较,SUV39H1过表达会降低Runt相关转录因子2(runt-related transcription factor 2,Runx2)、ALP、骨桥蛋白(osteopontin, OPN)、骨钙素(osteocalcin, OCN)基因的表达(P<0.05)。Western blot和免疫荧光结果显示,与过表达GFP对照组比较,SUV39H1过表达会抑制Runx2和ALP成骨蛋白的表达,同时会提高组蛋白H3第9位点赖氨酸三甲基化(histone H3 lysine 9 trimethylation, H3K9me3)蛋白表达水平(P<0.05)。结论 SUV39H1过表达会抑制C2C12细胞的成骨分化水平。

摘要： 旨在研究全羧化酶合成酶(holocarboxylasesynthetase,Hlcs)对糖酵解基因表达的影响,为进一步研究细胞糖酵解奠定基础。本试验以C2C12细胞为试验材料,采用siRNA技术干扰Hlcs基因,通过荧光定量PCR和Westernblotting检测Hlcs基因干扰对糖酵解基因表达的影响。结果表明,在C2C12细胞分化过程中,Hlcs基因与Pfkm、Pkm、Hk-2基因的表达趋势一致,提示Hlcs基因与糖酵解具有相关性。干扰Hlcs后,细胞分化形成的肌管数量明显少于对照组,糖酵解限速酶Pfkm的mRNA水平显著降低(P<0.05),而显著提高了Pkm的mRNA水平和蛋白表达水平(P<0.05);生物素作为羧化酶的辅酶,能够显著上调Pkm、Hk-2的mRNA水平(P<0.05)。干扰Hlcs后,细胞分化形成的脂滴数量明显少于对照组,Pfkm的mRNA水平显著升高(P<0.05),且Pkm的mRNA水平和蛋白表达水平显著升高(P<0.05);生物素的添加能够显著上调Pfkm、Pkm的mRNA水平(P<0.05)。综上所述,在C2C12细胞分化过程中,Hlcs基因与糖酵解基因表达趋势一致,且干扰Hlcs基因可以抑制成肌分化C2C12细胞中Pfkm和Hk-2基因的表达,促进Pkm的表达;而促进成脂分化C2C12细胞中Pfkm和Pkm的表达,抑制Hk-2基因的表达。

摘要： [目的]研究绵羊Myostatin前肽对C2C12细胞分化的影响.[方法]构建并包装Myostatin前肽基因过表达慢病毒质粒,包装慢病毒,分别用LV-CMV-MSTN-flag-GFP和LV-CMV-GFP慢病毒感染C2C12细胞,检测重组慢病毒对C2C12细胞的感染能力.[结果]LV-CMV-GFP感染组可见明显的长条状肌管,LV-CMV-MSTN-flag-GFP组只见少量肌管的形成,肌管融合率的测定.未处理组,对照组,试验组肌管融合率分别为5.53％、6.62％、9.38％,试验组即转染Myostatin前肽的肌管融合率显著高于对照组和未处理组(P<0.05).[结论]Myostatin前肽基因的过表达抑制了Myostatin基因的表达,影响肌管的形成,抑制了分化的进程.

摘要： [目的]本文旨在探究UCP3基因对C2C12成肌细胞增殖的调控作用.[方法]构建慢病毒包被的UCP3基因过表达和干扰载体,转染C2C12细胞,分别促进和抑制UCP3基因的表达;通过CCK?8和EDU染色试验检测C2C12细胞的增殖效果,采用qRT?PCR技术检测细胞增殖和凋亡的相关基因表达量的变化,利用Western Blot方法检测细胞增殖关键蛋白PCNA的变化.[结果]CCK?8和EDU染色试验结果发现,与过表达对照组(OE?NC)相比,UCP3基因过表达组(OE?UCP3)细胞的增殖速度极显著降低(P<0.01),细胞增殖相关基因PCNA和Ki67的mRNA表达量极显著降低(P<0.01),细胞凋亡相关基因Bax和caspase3的表达量极显著升高(P<0.01);细胞增殖关键蛋白PCNA的含量也极显著降低(P<0.01).与干扰对照组(Sh?NC)相比,UCP3基因干扰组(Sh?UCP3)细胞的增殖速度显著增加(P<0.05),细胞增殖相关基因PCNA和Ki67的mRNA表达量极显著增加(P<0.01),细胞凋亡相关基因Bax和cas?pase3的表达量显著降低(P<0.05),细胞增殖关键蛋白PCNA的含量也显著升高(P<0.05).[结论]UCP3基因可能通过抑制细胞增殖基因PCNA和Ki67的表达,促进细胞凋亡基因Bax和caspase3的表达而抑制C2C12细胞的增殖.该结果为骨骼肌中UCP3的功能研究提供基础数据.

摘要： 为探究miR-15b在荣昌猪不同体组织中的表达差异及其在C2C12细胞不同发育时期的动态表达变化,本研究采用RT-qPCR方法检测miR-15b在荣昌猪心脏、肝脏、脾脏、肺、肾脏、胃、肌肉、胸腺和小肠组织及其在C2C12细胞增殖和分化过程中的表达水平.结果表明:miR-15b在荣昌猪各组织中均有表达,其中在心脏和胸腺中的表达量最高,在肝脏和肾脏中的表达量最低;miR-15b的表达量在C2C12细胞的整个增殖过程中均显著升高,在C2C12细胞的整个分化过程中先显著升高再显著降低.综上所述,miR-15b在荣昌猪各组织广泛表达,其表达量在C2C12细胞的增殖和早期分化中显著升高,推测miR-15b在C2C12细胞的增殖以及分化早期发挥重要功能.

摘要： 目的 探讨阿仑膦酸钠(ALN)在地塞米松(Dexa)诱导C2C12细胞自噬中的作用及机制.方法 以C2C12细胞为研究对象,设对照组(DMSO处理),Dexa组(100μmol/L Dexa处理),Dexa+ALN组(100μmol/L Dexa+1.0μmol/L ALN处理).分别以0、0.1、0.5、1.0μmol/L ALN处理C2C12细胞48 h后,采用CCK-8法检测C2C12细胞增殖水平,筛选ALN合适剂量;HE染色法检测C2C12细胞分化;采用Image J统计肌小管直径和融合指数;Western blot检测C2C12细胞肌蛋白肌球蛋白重链(MHC)、肌肉特异性环指蛋白1(MuRF1)和自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3)、Beclin-1的表达变化;免疫荧光标记检测C2C12细胞MHC表达水平.结果 选取ALN合适剂量1.0μmol/L进行后续实验.HE染色和Image J结果显示ALN剂量为1.0μmol/L时,肌小管直径和融合指数显著增加(P<0.01).Western blot结果显示,与对照组相比,Dexa组细胞MuRF1蛋白表达水平升高;而与Dexa组相比,Dexa+ALN组MuRF1蛋白表达水平显著下调,自噬相关蛋白LC3、Beclin-1的表达增多(P<0.01).免疫荧光结果显示,与对照组相比,Dexa组MHC蛋白荧光表达强度(红光)明显降低;与Dexa组相比,Dexa+ALN组MHC蛋白荧光表达强度表达显著升高.结论 1.0μmol/L ALN能有效促进C2C12细胞增殖分化,改善Dexa对C2C12细胞分化的抑制作用,抑制肌降解蛋白MuRF1表达,其机制可能与适度激活自噬信号通路有关.

摘要： 本课题组在前期研究中发现IRS1是民猪和大白猪背最长肌中存在表达差异的一个关键基因,为了深入探讨IRS1在骨骼肌细胞中发挥的生物学功能,本研究首先将猪的IRS1基因完整编码区序列连入pcDNA3.1载体内,构建过表达质粒,同时人工合成IRS1的siRNA干扰序列,在C2C12细胞系内过表达或干扰IRS1基因,使用qRT-PCR技术检测生肌决定因子家族基因(MyoD、MyoG和Myf5)、决定肌纤维类型的MyHC I、MyHCⅡa、MyHCⅡb和MyHCⅡx基因以及PI3K、Akt、FoxO1基因的表达变化情况.结果表明,干扰IRS1基因后,肌细胞分化受阻,MRFs表达有下降趋势,过表达IRS1后,MRFs在不同分化时间发生了显著上调,说明IRS1对MyoD、Myf5和MyoG的转录有促进作用.过表达IRS1基因后,决定肌纤维类型的MyHCⅡa基因和MyHCⅡx基因表达水平均在诱导分化第6天时发生显著上调,干扰IRS1基因后,MyHC I型肌纤维在第4天和第6天、MyHCⅡx型在第6天时的表达量均发生了显著下调,说明IRS1可影响肌纤维类型.干扰IRS1基因后,诱导分化初期(2 d)Akt的表达量出现显著下调,到了诱导分化末期(6 d),FoxO1表达量出现显著上调,说明IRS1表达的变化可以激活IRS1/Akt/FoxO1信号通路.

摘要： 本研究旨在探究牛miR-1(bta-miR-1)参与调控肉牛骨骼肌发育的分子机制.通过采集布莱凯特黑牛和鲁西黄牛的背最长肌进行sRNA建库,筛选与肉牛骨骼肌发育相关的bta-miR-1,采用生物信息学方法鉴定其保守性和预测其靶基因PAX7;为验证bta-miR-1的功能:在成肌细胞中转染bta-miR-1模拟剂/阴性对照(bta-miR-1 mimic/NC)和bta-miR-1抑制剂/阴性对照(bta-miR-1 inhibitor/NC),48 h后用2％马血清诱导观察肌管分化过程,CCK-8检测细胞增殖率,qRT-PCR检测细胞增殖分化标记基因PCNA、CDK2、Myog、Myod1以及靶基因PAX7的表达量.结果表明,转染bta-miR-1 mimic促进肌管分化,降低细胞的增殖率(P<0.01),抑制靶基因PAX7的表达(P<0.01),转染bta-miR-1 inhibitor则抑制肌管分化,增加细胞的增殖率(P<0.05),促进靶基因PAX7表达(P<0.01);在细胞增殖方面,转染bta-miR-1 mimic降低其标记基因PCNA、CDK2的表达量(P<0.01),抑制组则相反;在细胞分化方面,转染bta-miR-1 mimic增加其标记基因Myog、Myod1的表达量(P<0.01),抑制组则相反.综上,bta-miR-1可能通过负调控靶基因PAX7促进成肌细胞分化、抑制成肌细胞增殖而参与骨骼肌的发育过程.

摘要： 研究通过检测鞘磷脂对小鼠肌卫星细胞C2C12成肌分化的影响,旨在为阐明鞘磷脂对解偶联蛋白1(UCP1)基因敲入猪骨骼肌生长的影响提供理论依据.用ELISA法检测野生型猪和UCP1敲入猪背部肌肉及血清中总鞘磷脂含量;利用CCK8法检测不同浓度(0、5、20、50和100 μg/mL)鞘磷脂对C2C12细胞增殖和毒性的影响,并通过形态学观察和分化前后细胞成肌分化标记基因生肌因子5(Myf5)、生肌决定因子(MyoD)、肌细胞生成素(Myogenin)、生肌调节因子4(MRF4)的表达检测,建立C2C12成肌分化体系;在成肌分化培养基中添加上述不同浓度的鞘磷脂,诱导分化6d后,通过形态学和Myogenin免疫荧光染色观察肌管的形成及成肌分化标记基因的mRNA表达水平检测,确定鞘磷脂的最佳添加浓度.用筛选出的最佳鞘磷脂添加浓度诱导细胞成肌分化,在2、4和6d收集细胞,利用实时荧光定量PCR检测周期蛋白相关基因CyclinD1、CyclinE、CDK2和CDK4的表达水平,CCK8法检测诱导2d细胞的活力.结果 发现,与野生型猪相比,UCP1-KI猪背部肌肉组织中总鞘磷脂含量显著增加(P＜0.05);血清鞘磷脂含量差异不显著(P＞0.05);不同浓度鞘磷脂对未分化C2C12细胞的增殖无显著影响(P＞0.05);成肌分化6d后,C2C12细胞形成明显的肌管,成肌分化标记基因My f5、MyoD、Myogenin、MRF4的mRNA和蛋白水平均极显著上调(P＜0.01);与未添加鞘磷脂的对照组相比,20 μg/mL鞘磷脂组有更多肌管形成,Myogenin阳性信号和肌管融合指数均显著增加(P＜0.05),Myogenin、MRF4基因的表达量显著提高(P＜0.05).利用20 μug/mL鞘磷脂诱导细胞分化,在分化2d时,处理组CyclinE、CDK4基因表达量显著高于对照组(P＜0.05),细胞活力也显著高于对照组(P＜0.05);分化6d后,处理组CyclinD1、CyclinE、CDK2、CDK4基因表达量均显著低于对照组(P＜0.05).本研究结果表明,20 μg/mL鞘磷脂能够提高小鼠肌卫星细胞C2C12分化早期细胞活力和成肌分化效率,可为研究鞘磷脂对骨骼肌生长的影响提供一定的参考.

摘要： 目的:研究代综方(DaiZongfang,DZF)对骨骼肌细胞葡萄糖摄取及葡萄糖转运体4(glucosetransporter4,GLUT4)蛋白表达的影响.rn 方法:采用马血清诱导C2C12骨骼肌细胞分化成熟,荧光标记的葡萄糖类似物2-NBDG测定葡萄糖摄取,对其作用的最佳浓度和时间进行优化;采用不同剂量DZF干预分化的C2C12细胞,检测其对细胞基础状态及胰岛素刺激状态下葡萄糖摄取的影响;western blot检测DZF对C2C12细胞GLUT4总蛋白表达及膜转位的影响.rn 结果:2-NBDG的最佳浓度为200μM,最佳时间为45min;在基础状态或胰岛素刺激下,DZF低、中、高剂量均可提高骨骼肌葡萄糖摄取,差异有统计学意义(P＜0.05).基础状态下,DZF能促进GLUT4总蛋白及膜转位蛋白的表达(P＜0.05);胰岛素刺激状态下,DZF对GLUT4总蛋白表达无显著影响(P＞0.05),但可显著促进GLUT4膜转位蛋白的表达(P＜0.05).rn 结论:DZF可增加骨骼肌细胞葡萄糖摄取,具有类胰岛素作用,其作用机制可能与促进GLUT4蛋白向细胞膜转位有关.

摘要： 目的:研究代综方(DaiZongfang,DZF)对骨骼肌细胞葡萄糖摄取及葡萄糖转运体4(glucosetransporter4,GLUT4)蛋白表达的影响.rn 方法:采用马血清诱导C2C12骨骼肌细胞分化成熟,荧光标记的葡萄糖类似物2-NBDG测定葡萄糖摄取,对其作用的最佳浓度和时间进行优化;采用不同剂量DZF干预分化的C2C12细胞,检测其对细胞基础状态及胰岛素刺激状态下葡萄糖摄取的影响;western blot检测DZF对C2C12细胞GLUT4总蛋白表达及膜转位的影响.rn 结果:2-NBDG的最佳浓度为200μM,最佳时间为45min;在基础状态或胰岛素刺激下,DZF低、中、高剂量均可提高骨骼肌葡萄糖摄取,差异有统计学意义(P＜0.05).基础状态下,DZF能促进GLUT4总蛋白及膜转位蛋白的表达(P＜0.05);胰岛素刺激状态下,DZF对GLUT4总蛋白表达无显著影响(P＞0.05),但可显著促进GLUT4膜转位蛋白的表达(P＜0.05).rn 结论:DZF可增加骨骼肌细胞葡萄糖摄取,具有类胰岛素作用,其作用机制可能与促进GLUT4蛋白向细胞膜转位有关.

摘要： 目的:研究代综方(DaiZongfang,DZF)对骨骼肌细胞葡萄糖摄取及葡萄糖转运体4(glucosetransporter4,GLUT4)蛋白表达的影响.rn 方法:采用马血清诱导C2C12骨骼肌细胞分化成熟,荧光标记的葡萄糖类似物2-NBDG测定葡萄糖摄取,对其作用的最佳浓度和时间进行优化;采用不同剂量DZF干预分化的C2C12细胞,检测其对细胞基础状态及胰岛素刺激状态下葡萄糖摄取的影响;western blot检测DZF对C2C12细胞GLUT4总蛋白表达及膜转位的影响.rn 结果:2-NBDG的最佳浓度为200μM,最佳时间为45min;在基础状态或胰岛素刺激下,DZF低、中、高剂量均可提高骨骼肌葡萄糖摄取,差异有统计学意义(P＜0.05).基础状态下,DZF能促进GLUT4总蛋白及膜转位蛋白的表达(P＜0.05);胰岛素刺激状态下,DZF对GLUT4总蛋白表达无显著影响(P＞0.05),但可显著促进GLUT4膜转位蛋白的表达(P＜0.05).rn 结论:DZF可增加骨骼肌细胞葡萄糖摄取,具有类胰岛素作用,其作用机制可能与促进GLUT4蛋白向细胞膜转位有关.

摘要： 目的:研究代综方(DaiZongfang,DZF)对骨骼肌细胞葡萄糖摄取及葡萄糖转运体4(glucosetransporter4,GLUT4)蛋白表达的影响.rn 方法:采用马血清诱导C2C12骨骼肌细胞分化成熟,荧光标记的葡萄糖类似物2-NBDG测定葡萄糖摄取,对其作用的最佳浓度和时间进行优化;采用不同剂量DZF干预分化的C2C12细胞,检测其对细胞基础状态及胰岛素刺激状态下葡萄糖摄取的影响;western blot检测DZF对C2C12细胞GLUT4总蛋白表达及膜转位的影响.rn 结果:2-NBDG的最佳浓度为200μM,最佳时间为45min;在基础状态或胰岛素刺激下,DZF低、中、高剂量均可提高骨骼肌葡萄糖摄取,差异有统计学意义(P＜0.05).基础状态下,DZF能促进GLUT4总蛋白及膜转位蛋白的表达(P＜0.05);胰岛素刺激状态下,DZF对GLUT4总蛋白表达无显著影响(P＞0.05),但可显著促进GLUT4膜转位蛋白的表达(P＜0.05).rn 结论:DZF可增加骨骼肌细胞葡萄糖摄取,具有类胰岛素作用,其作用机制可能与促进GLUT4蛋白向细胞膜转位有关.

摘要： 目的:研究代综方(DaiZongfang,DZF)对骨骼肌细胞葡萄糖摄取及葡萄糖转运体4(glucosetransporter4,GLUT4)蛋白表达的影响.rn 方法:采用马血清诱导C2C12骨骼肌细胞分化成熟,荧光标记的葡萄糖类似物2-NBDG测定葡萄糖摄取,对其作用的最佳浓度和时间进行优化;采用不同剂量DZF干预分化的C2C12细胞,检测其对细胞基础状态及胰岛素刺激状态下葡萄糖摄取的影响;western blot检测DZF对C2C12细胞GLUT4总蛋白表达及膜转位的影响.rn 结果:2-NBDG的最佳浓度为200μM,最佳时间为45min;在基础状态或胰岛素刺激下,DZF低、中、高剂量均可提高骨骼肌葡萄糖摄取,差异有统计学意义(P＜0.05).基础状态下,DZF能促进GLUT4总蛋白及膜转位蛋白的表达(P＜0.05);胰岛素刺激状态下,DZF对GLUT4总蛋白表达无显著影响(P＞0.05),但可显著促进GLUT4膜转位蛋白的表达(P＜0.05).rn 结论:DZF可增加骨骼肌细胞葡萄糖摄取,具有类胰岛素作用,其作用机制可能与促进GLUT4蛋白向细胞膜转位有关.

摘要： 目的:研究代综方(DaiZongfang,DZF)对骨骼肌细胞葡萄糖摄取及葡萄糖转运体4(glucosetransporter4,GLUT4)蛋白表达的影响.rn 方法:采用马血清诱导C2C12骨骼肌细胞分化成熟,荧光标记的葡萄糖类似物2-NBDG测定葡萄糖摄取,对其作用的最佳浓度和时间进行优化;采用不同剂量DZF干预分化的C2C12细胞,检测其对细胞基础状态及胰岛素刺激状态下葡萄糖摄取的影响;western blot检测DZF对C2C12细胞GLUT4总蛋白表达及膜转位的影响.rn 结果:2-NBDG的最佳浓度为200μM,最佳时间为45min;在基础状态或胰岛素刺激下,DZF低、中、高剂量均可提高骨骼肌葡萄糖摄取,差异有统计学意义(P＜0.05).基础状态下,DZF能促进GLUT4总蛋白及膜转位蛋白的表达(P＜0.05);胰岛素刺激状态下,DZF对GLUT4总蛋白表达无显著影响(P＞0.05),但可显著促进GLUT4膜转位蛋白的表达(P＜0.05).rn 结论:DZF可增加骨骼肌细胞葡萄糖摄取,具有类胰岛素作用,其作用机制可能与促进GLUT4蛋白向细胞膜转位有关.

摘要： 目的:研究代综方(DaiZongfang,DZF)对骨骼肌细胞葡萄糖摄取及葡萄糖转运体4(glucosetransporter4,GLUT4)蛋白表达的影响.rn 方法:采用马血清诱导C2C12骨骼肌细胞分化成熟,荧光标记的葡萄糖类似物2-NBDG测定葡萄糖摄取,对其作用的最佳浓度和时间进行优化;采用不同剂量DZF干预分化的C2C12细胞,检测其对细胞基础状态及胰岛素刺激状态下葡萄糖摄取的影响;western blot检测DZF对C2C12细胞GLUT4总蛋白表达及膜转位的影响.rn 结果:2-NBDG的最佳浓度为200μM,最佳时间为45min;在基础状态或胰岛素刺激下,DZF低、中、高剂量均可提高骨骼肌葡萄糖摄取,差异有统计学意义(P＜0.05).基础状态下,DZF能促进GLUT4总蛋白及膜转位蛋白的表达(P＜0.05);胰岛素刺激状态下,DZF对GLUT4总蛋白表达无显著影响(P＞0.05),但可显著促进GLUT4膜转位蛋白的表达(P＜0.05).rn 结论:DZF可增加骨骼肌细胞葡萄糖摄取,具有类胰岛素作用,其作用机制可能与促进GLUT4蛋白向细胞膜转位有关.

摘要： 目的:研究代综方(DaiZongfang,DZF)对骨骼肌细胞葡萄糖摄取及葡萄糖转运体4(glucosetransporter4,GLUT4)蛋白表达的影响.rn 方法:采用马血清诱导C2C12骨骼肌细胞分化成熟,荧光标记的葡萄糖类似物2-NBDG测定葡萄糖摄取,对其作用的最佳浓度和时间进行优化;采用不同剂量DZF干预分化的C2C12细胞,检测其对细胞基础状态及胰岛素刺激状态下葡萄糖摄取的影响;western blot检测DZF对C2C12细胞GLUT4总蛋白表达及膜转位的影响.rn 结果:2-NBDG的最佳浓度为200μM,最佳时间为45min;在基础状态或胰岛素刺激下,DZF低、中、高剂量均可提高骨骼肌葡萄糖摄取,差异有统计学意义(P＜0.05).基础状态下,DZF能促进GLUT4总蛋白及膜转位蛋白的表达(P＜0.05);胰岛素刺激状态下,DZF对GLUT4总蛋白表达无显著影响(P＞0.05),但可显著促进GLUT4膜转位蛋白的表达(P＜0.05).rn 结论:DZF可增加骨骼肌细胞葡萄糖摄取,具有类胰岛素作用,其作用机制可能与促进GLUT4蛋白向细胞膜转位有关.

摘要： 背景和目的：阻塞性睡眠呼吸障碍(OSA)以上气道肌肉塌陷为特征,而肥胖是OSA发生的重要危险因素,其机制与脂肪组织的堆积及脂肪因子对颏舌肌结构和功能的影响有关,本研究旨在探讨内脏脂肪素(Visfatin)对骨骼肌纤维形成的作用及其机制. 方法：不同浓度Visfatin(0μg/ml,0.25μg/ml,0.5μg/ml,1μg/ml,2.5μg/ml,5μg/ml)作用分化时的C2C12细胞72h后,用免疫蛋白印记法检测总重链肌球蛋白(myosin heavy chain,MHC),重链肌球蛋白I型(MHC I),Ⅱa型(MHCⅡa)及Ⅱb型(MHCⅡb)表达,免疫荧光检测MHC的表达.以Visfatin(5p g/ml)作用分化时的C2C12细胞,观察不同时间点(24h,48h,72h,120h)MHC,MHC I,MHCⅡa,MHC lib表达情况.进一步以Visfatin(5p g/ml)作用分化时的C2C12细胞72h后用免疫蛋白印记检测p-p38、p38、p-ERK、ERK、p-AKT473、p-AKT308、AKT、p-AMPK、AMPKs Myod、Myf5、MyoG、Myf6、Mef2A、Mef2C、Mef2D的表达情况. 结果:Visfatin作用分化时的C2C12细胞72h后，可促进MHC,MHCⅠ, MHCⅡa, MHCⅡb的表达，且随着Visfatin浓度增加表达量递增;分析Visfatin5μg/ml作用分化时的C2C12细胞不同时间点的变化，发现Visfatin促骨骼肌纤维形成的作用以72h最显著;进一步以Visfatin5 ug/ml作用分化时的C2C12细胞72h后发现，p-AKT473,p-AKT308,p-AMPK表达降低，Myod,MyfS表达增高，p-p38,p38,p-ERK,ERK,MyoG,Myf6,Mef2A,Mef2C,Mef2D表达未见明显改变。 结论:Visfatin可促进分化时的C2C12细胞各型重链肌球蛋白的表达，其机制可能与AKT、AMPK通路有关。

摘要： 背景和目的：阻塞性睡眠呼吸障碍(OSA)以上气道肌肉塌陷为特征,而肥胖是OSA发生的重要危险因素,其机制与脂肪组织的堆积及脂肪因子对颏舌肌结构和功能的影响有关,本研究旨在探讨内脏脂肪素(Visfatin)对骨骼肌纤维形成的作用及其机制. 方法：不同浓度Visfatin(0μg/ml,0.25μg/ml,0.5μg/ml,1μg/ml,2.5μg/ml,5μg/ml)作用分化时的C2C12细胞72h后,用免疫蛋白印记法检测总重链肌球蛋白(myosin heavy chain,MHC),重链肌球蛋白I型(MHC I),Ⅱa型(MHCⅡa)及Ⅱb型(MHCⅡb)表达,免疫荧光检测MHC的表达.以Visfatin(5p g/ml)作用分化时的C2C12细胞,观察不同时间点(24h,48h,72h,120h)MHC,MHC I,MHCⅡa,MHC lib表达情况.进一步以Visfatin(5p g/ml)作用分化时的C2C12细胞72h后用免疫蛋白印记检测p-p38、p38、p-ERK、ERK、p-AKT473、p-AKT308、AKT、p-AMPK、AMPKs Myod、Myf5、MyoG、Myf6、Mef2A、Mef2C、Mef2D的表达情况. 结果:Visfatin作用分化时的C2C12细胞72h后，可促进MHC,MHCⅠ, MHCⅡa, MHCⅡb的表达，且随着Visfatin浓度增加表达量递增;分析Visfatin5μg/ml作用分化时的C2C12细胞不同时间点的变化，发现Visfatin促骨骼肌纤维形成的作用以72h最显著;进一步以Visfatin5 ug/ml作用分化时的C2C12细胞72h后发现，p-AKT473,p-AKT308,p-AMPK表达降低，Myod,MyfS表达增高，p-p38,p38,p-ERK,ERK,MyoG,Myf6,Mef2A,Mef2C,Mef2D表达未见明显改变。 结论:Visfatin可促进分化时的C2C12细胞各型重链肌球蛋白的表达，其机制可能与AKT、AMPK通路有关。

摘要： 本发明涉及一种适用于骨科创伤治疗的骨科外敷膏。本发明的配方为：对氯苯酚(≥98％)：90％左右，甲醛(36.5～37.4％)：9.5％左右，分子筛：0.5％左右。制备方法为：将熔化的对氯苯酚抽入搪玻璃反应釜中，加入甲醛、分子筛。加热至110°C回流2小时。减压蒸去未反应的对氯苯酚。待液温降至110°C左右，加入碱水(浓度为25kg NaOH加入600L水中溶解)搅拌均匀。将上述溶液抽入萃取釜中，搅拌充分，静置1小时，放出水层。再将余下的碱液抽入萃取釜中萃取。第三次加入清水洗涤。合并水层，调pH值10左右，将此溶液过筛后插入结晶釜中，继续用酸溶液滴至中性，搅拌10min，复测pH在近中性，离心甩干，用少量水洗涤结晶，甩干，100°C干燥。

摘要： 本发明公开的一种基于一二次仿真的智能站二次安措方法及系统，包括，S101、读取变电站的SCD文件并进行解析，得到智能变电站的配置信息；S102、校验智能变电站的配置信息是否符合61850规范；S103、选择所要仿真的IED设备；S104、调用ADPSS仿真系统对IED设备进行仿真，模拟IED设备的运行状态及实时数据，生成IED设备的安措状态数据；S105、根据IED设备的安措状态数据，自动生成安措票；本发明解决了传统人工编制安措票难度大和易出错，提高了二次运维检修人员的工作效率，保证了二次检修安全隔离措施的有效性和正确性，为智能变电站运维、检修、改扩建工作提供安全可靠的二次检修安措实施技术保障和应用系统支撑体系，具有不可估量的经济效益。

摘要： 本发明提供一种一二次融合成套柱上断路器二次电气测量系统，包括14芯航空插座、6芯防开路航空插座和6芯航空插座，所述6芯航空插座的输入端连接柱上断路器本体上的断路器6芯航空插座输出端，所述6芯航空插座的输出端连接控制终端上的终端6芯航空插座输入端，所述14芯航空插座通过第一端子排连接零序电压表，所述6芯防开路航空插座通过第二端子排和第三端子排连接A、B、C相电流表以及零序电流表，所述6芯航空插座通过第四端子排连接第一电压表、第二电压表、第三电压表、第四电压表、第五电压表、第六电压表，本发明的测量系统接线简单，实现了一次接线同时测量11个二次电气参数的功能，满足准确度测量的检测需求，具有很好的实用性。

摘要： 本发明以苯酚为原料，用浓硫酸磺化合成4，4’－二羟基二苯砜(简称双酚S)，用1，2，4三氯苯作脱水剂，以芳香族二磺酸作异构体2，4’二羟基二苯砜的抑制剂，用水精制，得到4，4’－二羟基二苯砜白色结晶，纯度≥99.9％，得率为90％，生产成本低，过程简单，无污染，非常适用于工业化生产。

摘要： 本实用新型涉及存储装置的技术领域，且公开了一种4，4‑二氯二苯砜用存储装置，包括桶体，桶体的上表面活动卡合有盖板，盖板的上表面开设有，盖板的下表面设置有压平机构,压平机构包括有压板,压板设置在盖板的下方，通过设置压平机构配合盖板，在对桶体内部物料进行拿取后，物料在桶体内部存储的高度下降，将推柱带动圆轴以转轴为中心转动与短柱相垂直，此时连接板与短柱对转动柱进行挤推使转动柱以圆杆一轴心向下转动，转动柱在转动的同时带动圆杆二并拉动弹绳进行延伸，同时两侧转动柱带动压板迅速在桶体内向下并对物料进行压平的操作，借由对物料进行压平存储，使物料在存储时保持稳定状态，提高了对物料的密封保存效果。

摘要： 本实用新型公开一种一二次融合的二次小线箱，属于电力设备技术领域，包括箱体，所述箱体的一端设置有箱门，所述箱体的内底部均匀开设有滑槽，所述滑槽的内部滑动设置有隔板，所述隔板的两侧皆均匀设置有定位块，所述箱体远离箱门的一端开设有进线槽，所述进线槽的外侧铰接有遮板，所述遮板的顶部设置有限位机构。本实用新型箱体内端部一字型的进线槽的设置，能够方便将线缆进行塞入，再通过箱体内部多组滑槽以及隔板的设置，能够根据线缆的种类以及安装的位置关系，将线缆进行隔开，实用性更高，另外通过隔板外侧不同平面上定位块的设置，能够将隔间内部的线缆再次进行理线定位，方便进行检修以及安装。

摘要： 本实用新型公开了一种一二次融合环网箱中二次室密封装置，包括箱体，箱体对称转动设有箱门，箱体内部设有密封布，两个箱门上端与密封布一端之间均通过拉绳固定连接，箱体上部设有与密封布和拉绳匹配的收卷组件，箱体下侧固定设有安装基座，安装基座上设有复位机构，安装基座一端设有开槽，开槽上侧转动设有与密封布匹配的弧形挡板，开槽上侧对称设有两个挡板，两个挡板上端与箱体顶部固定连接，两个挡板下端与安装基座固定连接，两个挡板与两个箱门转动处位置匹配。本实用新型可对一二次融合环网箱中二次室进行密封遮挡，具有较好的保护作用，同时灵活性较高，不会影响工作人员的正常作业，整体可靠性较高。

摘要： 本申请涉及一种一二次融合配电开关二次设备端口测量装置屏蔽壳体，基于电磁波辐射路径，采用屏蔽方式截断干扰波，屏蔽箱采用双层屏蔽壳层结构，中间的环氧树脂材料保证绝缘强度，四周环氧树脂高于两侧屏蔽壳层形成凹槽，屏蔽底板采用相同宽度和厚度的安装凸起，从而实现屏蔽装置无缝配合，正常工作时，内部信号采集装置、信号转换装置、充电锂电池和逆变装置固定在指定位置，屏蔽外壳两侧由卡钩进行固定，防止整个装置在使用过程中出现损坏现象。本实用新型的一二次融合配电开关二次设备端口测量装置屏蔽壳体，可以有效截断电磁干扰传播路径，有效提升采集装置的可靠性。

摘要： 一二次设备二次回路一体化配线系统，其特征在于：在GIS元件与智能组件中间设置综合端子排，进线电缆首先进入GIS元件，从GIS元件输出的信号通过电缆在综合端子排转接后，直接进入智能组件。采用是上述技术方案的本实用新型，配线一体化，取消GIS元件与二次设备的冗余端子排，减少转接次数，厂内完成装置背板接线。在此基础之上，也能实现调试一体化：明确成套设计职责划分，厂内带二次设备联合调试，实现一次智能设备即插即用。

摘要： 本实用新型公开了一种一二次融合开关的检测装置和一二次电气柜，涉及电路检测维修技术领域，该装置包括万用表、万用表安装机构、第一移动机构、第二移动机构；万用表上固定连接有检测端，万用表安装在万用表安装机构上；万用表安装机构固定连接在第一移动机构的移动端上，第一移动机构的移动端能够沿直线移动；第一移动机构固定连接在第二移动机构的移动端上，第二移动机构的移动端能够沿垂直于第一移动机构的移动方向的直线移动。本实用新型的优点在于：能够提高一二次融合开关故障检测的安全性和检测效率。