用于SSR分析的大豆干种子DNA提取条件的优化

摘要

[目的] 探讨适于SSR分析的大豆干种子DNA提取的最佳方法.[方法] 以2个大豆品种的干种子为材料, 分别采用改良SDS法和CTAB法提取大豆基因组DNA, 用1%琼脂糖凝胶电泳检测DNA质量,用紫外分光光度计分别测定其DNA在A230、A260和A280下的吸光值,根据A260/A230和A260/A280的比值检测DNA的纯度和浓度,并分别以两种DNA为模版进行SSR-PCR扩增.[结果] 相同DNA提取条件下,SDS法提取DNA样品的纯度和浓度均高于CTAB法,SDS终浓度为2%(W/V),水浴15 min,氯仿/异戊醇抽提2次时所提取大豆种子DNA的纯度及浓度最高,其DNA的OD260/OD280值为1.86,SDS法所提的DNA泳带分布较集中,无拖尾现象,其DNA浓度能够满足SSR扩增模板的需求.[结论] SDS浓度为2%(W/V),水浴15 min,氯仿/ 异戊醇抽提2次时提取大豆干种子DNA的浓度和纯度都较高,可以满足后续的各种分子生物学操作的要求.