中棉光诱导基因Gacab启动子的克隆及其功能分析

摘要

利用加接头法,从金华中棉(Gossypiumarboreum)中分离获得了捕光叶绿素a/b蛋白复合体基因Gacab编码区5'上游的调控序列l 009 bp,命名为GacabP,与公布的其它植物cab启动子序列比较,没有明显的同源性.将Gacab P和197、504、779 bp的5'端缺失体分别与gus(uid A)基因融合,构建植物表达载体.用Gacab P::gus转化烟草(Nicotianatabacum cv.NC89),GUS组织化学分析发现GacabP驱动gus基因在转基因烟草的叶片表达.在暗培养的转基因烟草叶片中GacabP不表现活性,而光能够诱导gus基因的表达,表明GacabP是一种光诱导型启动子.用基因枪轰击水稻愈伤组织,结果显示,GacabP及3种不同长度的缺失体均可驱动gus基因的瞬时表达,以504 bp的活性最高,瞬时表达水平明显高于35S启动子,197、779和1 009bp的表达减弱,由此推测-197～-1 bp为Gacab基因的基本启动子,-504～-197 bp间包含正调控元件,-1 009～-504 bp间包含负调控元件.