复方中草药对虹鳟脾脏非特异性免疫指标及免疫相关基因表达的影响

摘要

中草药具有丰富的活性物质,具有提高机体免疫力、抗病及无残留等特性,已在水产养殖中被广泛应用。为探讨饲料中添加不同水平的复方中草药(黄芪(Astragalus radix),党参(Codonopsis pilosula),当归(Angelica sinensis),甘草(Glycyrrhiza uralensis),麦冬(Ophiopogon japonicus),茯苓(Poria cocos),山楂(Hawthorn),金银花(Lonicera japonica),板蓝根(Isatidis radix)和大青叶(Isatis indigotica Fortune))对虹鳟(Oncorhynchus mykiss)脾脏非特异性免疫及免疫相关基因表达的影响,本研究选取120尾虹鳟为实验对象,随机分为4组,分别在基础饲料中添加0(对照组)、10、20和30 g/kg复方中草药连续投喂35 d。在投喂第7、21和35 d时取脾脏组织用于非特异性免疫指标的测定,并利用qPCR分析虹鳟脾脏中15个免疫相关基因的表达差异。结果显示,与对照组相比,在投喂的3个时期复方中草药均能显著提高虹鳟脾脏中总超氧化物歧化酶(total superoxide dismutase,T-SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)、溶菌酶(lysozyme,LZM)及酸性磷酸酶(acid phosphatase,ACP)的活性(P<0.05),其中以20 g/kg组效果最佳;与对照组相比,10、20和30 g/kg组丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量均在投喂的3个时期显著下降(P<0.05),且30 g/kg组效果最佳。基因表达结果显示,与对照组相比,投喂第35 d时,20 g/kg组能显著诱导脾脏中Toll样受体3(Toll-like receptor 3,tlr3)、Toll样受体7(tlr7)、髓样分化因子88(medullary differentiation factor 88,myd88)、白细胞介素1β(interleukin-1β,il-1β)和细胞核因子κB抑制剂α(nuclear factor kappa B inhibitor alpha,nfkbia)基因的表达(P<0.05);各处理组肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,tnf-α)基因表达差异不显著,Toll样受体8(tlr8)在30 g/kg组显著上调(P<0.05);同时,免疫相关基因干扰素调节因子3(interferon regulatory factor 3,irf3)、干扰素调节因子7(irf7)、黑色素瘤分化相关蛋白5(melanoma differentiation-associated protein 5,mda5)、RIG-I样受体2(RIG-I-like receptor 2,lgp2)、白细胞介素8(il-8)、干扰素β(interferon-β,ifn-β)、信号转导和转录激活因子1(signal transducer and activator of transcription 1,stat1)和janus激酶1(janus kinase 1,jak1)表达量也在20 g/kg组中显著上调(P<0.05)。本研究表明,该复方中草药可以增强虹鳟非特异性免疫能力和免疫相关基因的表达,且饲料中复方中草药建议添加量为20 g/kg。本研究为促进复方中草药作为免疫刺激剂在水产养殖中的合理应用及发展提供了科学依据。