神经胶质瘤细胞中SWAP-70慢病毒载体的构建及表达

摘要

目的 构建下调及过表达SWAP-70的慢病毒载体,并检测其在神经胶质瘤细胞中的表达效果.方法 采用PCR扩增目的基因片段,构建SWAP-70慢病毒表达载体,与慢病毒转染系统共转染至293T细胞.收集病毒颗粒上清液,感染神经胶质瘤细胞.荧光显微镜下观察细胞中绿色荧光蛋白的表达情况,并采用Western blot法鉴定SWAP-70蛋白表达水平.结果 成功构建下调及过表达SWAP-70的慢病毒载体,感染神经胶质瘤细胞的效率达90％左右.Western blot结果显示,下调SWAP-70的神经胶质瘤细胞中SWAP-70蛋白表达降低(P＜0.01),而过表达SWAP-70的神经胶质瘤细胞中内源性及外源性SWAP-70蛋白均有表达.结论 成功建立下调及过表达SWAP-70的慢病毒载体,并有效转染神经胶质瘤细胞,为胶质瘤的基因治疗研究提供参考.