lncRNA PWRN2在胶质瘤组织中的表达及对胶质瘤细胞增殖和迁移能力的影响

摘要

目的 观察长链非编码RNA (long-chain noncoding RNA,lncRNA) PWRN2在胶质瘤组织中的表达及对胶质瘤细胞增殖和迁移能力的影响,探讨PWRN2可能的作用机制.方法 运用实时荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)技术检测PWRN2在42例胶质瘤组织及对应癌旁组织、5种胶质瘤细胞株及正常脑胶质细胞中的表达.以阴性对照慢病毒感染U-87 MG细胞作为对照组(4个细胞),以携带PWRN2序列的重组慢病毒(LV-PWRN2)感染U-87 MG细胞为试验组(4个细胞).采用噻唑蓝法、细胞划痕实验分别检测上调PWRN2对U-87 MG细胞增殖和迁移能力的影响.采用qPCR检测上调PWRN2对Klotho基因mRNA表达的影响,通过蛋白质印记法检测Klotho蛋白和转化生长因子-β(TGF-β)信号通路蛋白的表达.结果 PWRN2在胶质瘤组织中的表达水平低于癌旁组织[(1.25±0.52)比(6.28±0.66),P＜0.01].PWRN2在胶质瘤细胞株(U-87 MG、LN382、C6、SNB-19、U251)中的表达水平均低于正常脑胶质HEB细胞(均P＜0.05),在U-87 MG细胞株的表达水平最低(P＜0.01).LV-PWRN2慢病毒感染细胞后,PWRN2表达水平明显增加[(10.28±0.84)比(1.02±0.12),P＜0.01].上调PWRN2可明显抑制细胞增殖能力(P＜0.05)和迁移能力(P＜0.01).上调PWRN2可明显促进Klotho基因的表达[(4.33±0.53)比(1.01±0.09),P＜0.01],抑制TGF-β信号通路蛋白的表达.结论 PWRN2在胶质瘤组织及细胞株中呈低表达,上调PWRN2可抑制U-87 MG细胞的增殖和迁移,其作用机制可能是上调PWRN2促进Klotho基因的表达,抑制TGF-β信号通路的转导.