可诱导性表达呼吸道合胞病毒蛋白细胞系的快速构建方法研究

摘要

目的 研发用以快速构建多种可诱导性表达呼吸道合胞病毒(RSV)蛋白的细胞系创新性的技术路线.方法 将不同的RSV病毒蛋白基因分别连接到含有PiggyBac转座子位点的Cumme诱导表达载体上,与PiggyBac转座酶质粒共转染HEK293细胞,利用嘌呤霉素进行筛选,并用Cumate诱导病毒蛋白表达.结果 流式细胞仪及Westernblot检测结果均表明,加入诱导剂Cumate后,筛选的细胞系中开始表达相应的病毒蛋白,提示细胞系构建成功.结论 利用PiggyBac转座子可以高效率的构建诱导性表达RSV病毒蛋白的细胞系.