萝卜硫素介导的内质网应激对尿酸诱导的肾小管上皮细胞凋亡的影响及其机制

摘要

目的 探讨萝卜硫素对肾小管上皮细胞(HK-2)凋亡的影响及其对内质网应激IRE-1/JNK信号通路活化的作用.方法 体外采用尿酸(200 mg/L)诱导HK-2细胞损伤模型,将细胞分为对照组、尿酸组(200 mg/L尿酸干预HK-2细胞24h)、低剂量萝卜硫素组(200 mg/L尿酸和10 μM萝卜硫素共同干预HK-2细胞24h)、中剂量萝卜硫素组(200 mg/L尿酸和20 μM萝卜硫素共同干预HK-2细胞24h)和高剂量萝卜硫素组(200 mg/L尿酸和40 μM萝卜硫素共同干预HK-2细胞24h).CCK8法分析了HK-2细胞增殖活性,流式细胞术检测了HK-2细胞凋亡率,Western blot分析了Cleaved caspase 3、Cleaved caspase 12、BiP/GRP78、IRE-1和JNK蛋白表达水平.结果 与对照组比较,尿酸组HK-2细胞相对存活率明显降低(P＜0.05),细胞凋亡率明显增高(P＜0.05),Cleaved caspase 3、Cleaved caspase 12、BiP/GRP78、IRE-1和JNK蛋白表达明显升高(P＜0.05).与尿酸组比较,不同浓度萝卜硫素组HK-2细胞相对存活率明显增高(P＜0.05),细胞凋亡率明显降低(P＜0.05),Cleaved caspase 3、Cleaved caspase 12、BiP/GRP78、IRE-1和JNK表达明显下调(P＜0.05).结论 萝卜硫素通过抑制内质网应激IRE-1/JNK信号通路活化,降低肾小管上皮细胞的凋亡.