白藜芦醇对IEC-6细胞辐射损伤的防护作用及机制研究

摘要

目的 探讨白藜芦醇对大鼠小肠隐窝细胞(IEC-6)辐射损伤的防护作用及机制.方法 采用不同剂量(2、4、6、8、10 Gy)的6 MeV高能X射线对大鼠IEC-6细胞进行照射,应用克隆形成实验检测细胞增殖,建立IEC-6细胞辐射损伤模型.应用CCK-8检测不同浓度白藜芦醇(0.1、0.5、1、5、10、20、40μmol/L)对IEC-6细胞活力的影响,以及不同浓度白藜芦醇(0.1、1、2、4、6、8μmol/L)对照射后细胞活力的影响.将细胞分为对照组、模型组(10 Gy)和白藜芦醇组(10 Gy,1μmol/L),对照组接受伪照射并予等量载体孵育;模型组接受6 MeV高能X射线照射,予等量载体孵育;白藜芦醇组在照射前2h予相应浓度的白藜芦醇预处理,接受与模型组等剂量的高能X射线照射.采用Annexin V-PI染色检测细胞凋亡;DCFH-DA荧光探针检测活性氧;β-Gal染色检测细胞衰老;Real-time qPCR、Western Blot检测p16、p21、CAT和SOD2的mRNA水平及相应蛋白质表达情况.多组间数据比较采用单因素方差分析,应用Tukey's HSD法进行事后两两比较.结果 4～10 Gy电离辐射明显抑制IEC-6细胞增殖,呈剂量依赖性(均P0.05);浓度为0.1μmol/L、1μmol/L的白藜芦醇可增加电离辐射后细胞活力(均P<0.05).白藜芦醇组细胞凋亡率、DCFH-DA荧光强度、β-Gal阳性率均低于模型组(均P<0.05);白藜芦醇组细胞中CAT、SOD2的mRNA水平及相应蛋白质表达较模型组升高(均P<0.05),但p16、p21的mRNA水平及相应蛋白质表达较模型组降低(均P<0.05).结论 白藜芦醇可以降低活性氧水平,抑制细胞衰老和凋亡,从而减轻IEC-6细胞辐射损伤.