用碘化异丁酰硫代胆碱和2,2'-二硫联吡啶测定人血清丁酰胆碱酯酶活性

摘要

目的 建立用碘化异丁酰硫代胆碱和2, 2'-二硫联吡啶(2-PDS)测定人血清丁酰胆碱酯酶(EC 3.1.1.8)活性的新方法.方法 碘化异丁酰硫代胆碱被丁酰胆碱酯酶水解,释放出硫代胆碱,后者和2, 2'-二硫联吡啶反应,产物在340 nm有最大吸收峰,且吸光度的变化量与丁酰胆碱酯酶的活性成正比;并对反应条件和方法性能进行研究.结果 本方法pH值选择为8.0,EPPS缓冲液为200 mmol/L,底物浓度为1.0 mmol/L,2-PDS为0.2 mmol/L,Hill系数为1.10,Km为(6.7～6.9)×10-3 mmol/L,线性为0～2 000 U/L.批内变异系数为0.4% ～1.3%,批间为0.8% ～ 2.7%.与碘化丁酰硫代胆碱/5,5'-双硫代-2-硝基苯甲酸方法的相关系数为0.994.结论 这种方法具有较好的准确性、重复性、线性和抗干扰能力,与对照方法相比较,具有较好的相关性,可以应用于手工和全自动分析仪.