肝细胞生长因子通过促进内源性干细胞增殖治疗大鼠肝硬化的研究

摘要

目的探讨不同剂量肝细胞生长因子（hepatocyte growth factor,HGF）促进内源性干细胞增殖治疗肝硬化的疗效。方法通过腹腔注射50%四氯化碳橄榄油溶液构建肝硬化模型,100只模型大鼠随机分成四个实验组:分别为腹腔注射HGF低剂量组、中剂量组、高剂量组以及空白对照组,采用血清学检测比较四个实验组大鼠丙氨酸氨基转移酶（alanine transaminase,ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（aspartate transaminase,AST）、白蛋白（albumin,ALB）以及总胆红素（total bilirubin,TBIL）水平来评估肝脏功能,应用RT-PCR、Westem blot、免疫组织化学检测ALB、角蛋白18 （cytokeratin 18,CK18）、肝细胞核因子-4α（hepatocyte nuclear factor-4α,HNF-4α）蛋白变化,评估肝细胞增殖情况。通过EdU荧光标记内源性干细胞,评估其向肝样细胞分化情况。结果血清学检测表明治疗第4周各治疗组较空白对照组AST、ALT、TBIL均有显著降低,中剂量组与低剂量组之间差异具有统计学意义（均P ＜0.05）。ALB各治疗组于第4周均较对照组显著升高,且各治疗组间差异具有统计学差异（均P ＜0. 05）。免疫组织化学、RT-PCR、Western blot半定量分析表明HNF-4α、ALB以及CK18蛋白表达在中、高剂量组与对照组及低剂量组之间差异具有统计学差异（均P＜0.05）。免疫荧光半定量分析,中、高剂量组ALB、CK18蛋白阳性细胞数与对照组及低剂量组相比,差异均具有统计学意义（均P＜0.05）。结论多次反复腹腔注射HGF可促进内源性干细胞增殖并缓解大鼠肝硬化,且最佳腹腔注射剂量为20 mg/kg/d。