Smile来源的角膜基质透镜构建组织工程角膜基质支架的实验研究

摘要

cqvip:目的:探究用全飞秒激光小切口微透镜摘除术(Smile)来源的角膜基质透镜构建组织工程角膜基质支架的可行性及最佳保存条件。方法:从Smile来源的角膜基质透镜中分离培养人角膜基质细胞(HCFs),采用MTT法检测人纤维蛋白粘合剂(FS)对细胞的毒性作用;将FS粘贴双层角膜基质透镜构建的双层透镜支架分别置于不同介质(无水甘油、透明质酸钠、胎牛血清、模拟湿房环境)及不同温度(常温、4℃、-20℃)中保存,对比支架透明度及硬度。结果:MTT检测结果显示,FS作用0~72h,HCFs与正常培养细胞具有相似的增殖趋势,细胞毒性评级为0~1级,相对生存率均超过90%。FS粘贴的双层基质透镜支架表面平整、贴合紧密、透明度良好且硬度适宜。4℃保存14d后,无水甘油中9枚支架复水后均未出现开裂情况,透明度良好;透明质酸钠中9枚支架中3枚出现开裂,剩余6枚完整,透明度尚可;模拟湿房环境中9枚支架均无开裂现象,但皱缩严重;胎牛血清中9枚支架全部开裂,水肿严重。保存14d后,常温无水甘油中的15枚支架其中2枚保持无色透明,5枚轻微变黄但透明度尚可,8枚严重变黄且透明度明显降低;4℃无水甘油中的15枚支架其中5枚无色透明,10枚轻微变黄且透明度良好;-20℃无水甘油中的15枚支架均保持无色透明状态,未出现变黄情况。结论:FS是一种安全无毒的生物胶,可利用FS粘贴Smile来源的角膜基质透镜构建稳定性好、透明度高且硬度适宜的角膜基质支架,且-20℃无水甘油是角膜基质透镜支架的较佳保存条件。