MicroRNA-27a通过靶向HBx mRNA抑制HBV复制

摘要

目的 探究微小RNA-27a(microRNA-27a,miR-27a)在HBV感染中的作用及分子机制.方法 实时定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)方法检测miR-27a对HBV DNA和HBV RNA的影响.ELISA法检测miR-27a对HBeAg和HBsAg的影响.生物信息学预测miR-27a的靶基因,然后用双荧光素酶报告基因检测、qRT-PCR和western blot检测miR-27a是否能够直接靶向靶基因以及对靶基因mRNA和蛋白表达的影响.最后用qRT-PCR检测HBV蛋白表达对miR-27a的影响.结果 MiR-27a能抑制HBV DNA、HBV RNA、HBeAg和HBsAg等HBV复制和表达的指标.生物信息学预测和双荧光素酶报告基因检测表明miR-27a能够直接靶向HBx,抑制HBx mRNA和蛋白表达.反之,HBx蛋白表达能抑制细胞内miR-27a的表达.结论 MiR-27a通过直接靶向HBx进而抑制HBV的复制和表达,可以作为一种新的治疗HBV感染的潜在靶点.