金鱼hAT家族转座子Tgf2的克隆及其结构

摘要

hAT家族转座子以果蝇hobo、玉米Ac和金鱼草(Ceratophyllum demersum L.) Tam3为代表, 以"剪切-粘帖"方式进行DNA转座.1996年, 日本学者首次在白化青鳉(Oryzias latipes)中发现具有天然活性的脊椎动物hAT家族转座子, 即青鳉Tol2转座子, 该转座子已在模式生物斑马鱼转基因、基因和启动子捕获方面进行了广泛应用.文章根据玉米Ac与青鳉Tol2转座子序列保守区设计一对引物, 在19种不同鱼类物种或品系中进行PCR筛选, 最后发现此类hAT家族转座子在我国不同品系金鱼中存在, 命名为金鱼Tgf2转座子.金鱼Tgf2转座子全长4 720 bp, 由4个阅读框组成, 与青鳉Tol2转座子的相似度为97%.金鱼Tgf2与青鳉Tol2转座子在末端倒位重复和亚末端重复上存在一定差异, 此外, 金鱼Tgf2转座子的中间反向重复序列(1 453 bp到2 091 bp)可形成一种"十"字结构, 明显有别于青鳉Tol2转座子形成的茎环结构, 这些区域与转座活性密切相关.文章预示金鱼Tgf2转座子可能具有更高的天然转座活性, 构建高效金鱼Tgf2转基因元件可供鱼类转基因和基因捕获研究.