咪达唑仑调控miR-875-5p/STAG2轴对食管癌细胞增殖及凋亡的影响

摘要

目的:探讨咪达唑仑(MID)调控miR-875-5p/基质抗原2(STAG2)轴对食管癌细胞增殖及凋亡的影响。方法:用不同浓度的MID(0,10,20,30,40μmoL/L)处理食管癌Eca109细胞24h,通过CCK-8法筛选适宜的MID浓度;采用高通量miRNA转录组学对30μmoL/L处理的Eca109细胞中差异表达的miRNA进行筛选;流式细胞术检测Eca109细胞凋亡及细胞周期;qRT-PCR检测miR-875-5p及STAG2 mRNA表达水平;双荧光素酶实验验证miR-875-5p与STAG2的关系;将miR-875-5p模拟物(miR-875-5p mimics)转染于Eca109细胞并用30μmoL/L MID干预,观察细胞存活率、凋亡率、细胞周期的变化;Western blot检测STAG2蛋白表达;体内异种移植瘤实验检测MID及miR-875-5p对裸鼠体内移植瘤生长的影响。结果:选用30μmoL/L MID用于后续研究;在30μmoL/L处理的Eca109细胞中筛选出显著性下调的miRNA中有miR-875-5p;30μmoL/L MID干预或下调miR-875-5p表达均能够使Eca109细胞增殖能力、miR-875-5p表达、S期细胞比例降低,细胞凋亡率、G0/G1期细胞比例增加(P<0.05);miR-875-5p和STAG2存在靶向负向调控关系;上调miR-875-5p表达可逆转MID对Eca109细胞增殖、凋亡及细胞周期的作用,同时还可逆转MID对裸鼠体内移植瘤生长的抑制作用。结论:MID通过下调miR-875-5p水平靶向促进STAG2表达,从而抑制Eca109细胞增殖,促进细胞凋亡。