硼替佐米对人甲状腺癌细胞凋亡侵袭及AMPK/mTOR/4EBP1通路的影响

摘要

目的:探究硼替佐米对人甲状腺癌(TC)细胞凋亡、侵袭的影响及可能的作用机制。方法:体外培养人甲状腺乳头状癌B-CPAP细胞,MTT法筛选硼替佐米的实验浓度及时间;取指数增长期的甲状腺癌B-CPAP细胞,分为对照组、AICAR组(AMPK激活剂2mmoL/L)、硼替佐米(50nmoL/L)组、硼替佐米+Compound C组(硼替佐米50nmoL/L+AMPK抑制剂Compound C 5μmoL/L);流式细胞仪检测各组B-CPAP细胞凋亡率;Transwell实验检测细胞侵袭能力;Western Blot检测细胞凋亡、侵袭以及AMPK/mTOR/4EBP1通路相关蛋白的表达[B细胞淋巴瘤/白血病-2基因(Bcl-2)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspases-3)、E-钙黏连蛋白(E-cadherin)、β-连接素(β-catenin)、腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、真核翻译起始因子4E结合蛋白1(4E-BP1)及其磷酸化蛋白]。结果:不同浓度的硼替佐米能不同程度的抑制B-CPAP细胞的生长,与对照组相比,AICAR组和硼替佐米组B-CPAP细胞凋亡率、Caspases-3、E-cadherin、β-catenin的表达、p-AMPK/AMPK的比值显著升高(P0.05);使用AMPK抑制剂Compound C可升高p-mTOR/mTOR、p-4EBP1/4EBP1的比值,明显减弱硼替佐米对甲状腺癌B-CPAP细胞侵袭的抑制作用及促凋亡作用。结论:硼替佐米可抑制人甲状腺癌细胞增殖、侵袭,并诱导细胞凋亡,其作用机制可能与激活AMPK,抑制mTOR和4EBP1的活化有关。