毛蕊异黄酮调控TLR4/p38MAPK通路减轻脓毒症大鼠心肌损伤的机制研究

摘要

目的 观察毛蕊异黄酮减轻脓毒症大鼠心肌损伤的作用,并探讨其是否能够调控Toll样受体4(TLR4)/丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)通路发挥此作用及具体的机制.方法 54只成年SD大鼠随机分为6组,除正常对照组(NC组)外其余均建立脓毒症模型.成功后阳性对照组(PC组)予以乌司他丁100 kU/kg溶于1 ml/100 g 0.9％氯化钠溶液中经腹腔注射,低、中、高浓度组(A、B、C组)分别予以5、10、20 mg/kg毛蕊异黄酮溶于1 ml/100 g 0.9％氯化钠溶液中经腹腔注射;模型对照组(MC组)和NC组均予以1 ml/100 g 0.9％氯化钠溶液经腹腔注射.1次/d,干预1周.干预后均处死,对比干预后心肌组织TLR4、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、一氧化氮(NO)含量;苏木素-伊红染色法(HE)观察心肌组织病理情况;脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测心肌组织细胞凋亡指数(AI);实时聚合酶链反应(RT-PCR)检测心肌组织TLR4、p38MAPK mRNA表达;蛋白质免疫印迹法(WB)检测心肌组织TLR4、p38MAPK蛋白表达和磷酸化p38MAPK(p-p38MAPK)水平.结果 MC组心肌组织TLR4、TNF-α、NO含量,心肌细胞AI均较NC组升高(P<0.01),PC组和3浓度组均较MC组下降(P<0.01),PC组、B组、C组均较A组下降(P<0.01),C组均较PC组、B组下降(P<0.01);MC组心肌纤维和细胞均呈严重病理改变,PC组和3个浓度组病理变化均显著减轻,且C组与NC组最为接近;MC组心肌组织TLR4 mRNA及蛋白,p-p38MAPK水平均高于NC组(P<0.01),PC组和3个浓度组均低于MC组(P<0.01),PC组、B组、C组均较A组下降(P<0.01),C组均较PC组和B组下降(P<0.01).结论 对脓毒症大鼠腹腔注射毛蕊异黄酮可控制心肌组织炎性反应,减轻病理改变,抑制心肌细胞凋亡,且其作用呈浓度依赖性,推测与抑制TLR4 mRNA与蛋白表达,控制p-p38MAPK有关.