耐多药结核分支杆菌基因突变在耐药性检测中的应用

摘要

目的探讨耐多药结核病(MDR-TB)临床分离株rpoB,KatG和rpsL基因突变在耐药性检测中的应用价值.方法采用聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)技术分析了同时耐异烟肼(INH)、利福平(RFP)、链霉素(SM)的多耐药临床分离株和35株药物敏感株的rpoB,KatG,rpsL基因突变.结果以结核分支杆菌H37RV为对照,35株药物敏感株的rpoB,rpsL基因SSCP图谱正常,其特异性为100%;KatG基因有2株图谱异常,特异性为94%.71株结核分支杆菌临床分离株均未发现rpoB,KatG,rpsL基因缺失,其PCR扩增产物SSCP分析结果表明,36株多耐药临床分离株中,32株rpoB基因图谱异常,21株KatG基因图谱异常,26株rpsL基因图谱异常;其敏感性分别为rpoB(89%),KatG(58%),rpsL(72%).结论结核分支杆菌耐RFP,INH,SM耐药性的产生主要是由于rpoB,KatG和rpsL基因突变所致;PCR-SSCP技术有望成为结核分支杆菌耐药性检测的方法之一.