红桦组织培养体系的建立

摘要

[目的]探究红桦组织培养各个阶段的最佳培养基配比,建立红桦组织培养体系,为红桦良种选育、定向培育及遗传转化等研究提供理论支持.[方法]以红桦休眠芽为外植体,研究外植体最佳消毒灭菌方法,6-BA、NAA浓度对休眠芽萌发、增殖培养的影响以及基本培养基类型、IBA和蔗糖浓度对不定根诱导的影响.[结果]表明:完整的红桦组织培养体系为:(1)以红桦休眠芽为外植体,先用70％酒精消毒30 s,无菌水冲洗3～4次,再用0.1％HgCl2灭菌8min,无菌水冲洗5～6次获得无菌材料;(2)休眠芽萌发最适宜培养基配方为WPM+1.5 mg·L-1 6-BA+0.1 mg·L-1 NAA,外植体萌发率为83.33％;(3)增殖培养所需最佳激素配比为WPM+1.5 mg·L-1 6-BA+0.02 mg·L-1 NAA,增殖系数达到4.77,健康指数达到2.45;(4)不定根诱导最佳配比为WPM+0.8 mg·L-1 IBA,生根率达100％,根健康指数为2.61;所有培养基均附加30 g·L-1蔗糖与7 g·L-1琼脂.[结论]红桦以WPM为基本培养基,添加不同浓度的6-BA、NAA、IBA,可成功进行各阶段的培养,最终建立完整的红桦器官发生途径再生体系,再生植株移植成活率在80％以上.