影响聊红槐离体叶片再生因子的研究

摘要

蔗糖浓度对聊红槐试管苗的增殖倍数的影响较小,但影响试管苗的生长形态,在WPM培养基中蔗糖浓度由原来20 g·L-1增加到60 g·L-1时,叶片由皱褶变为正常,颜色变为深绿.经过以下培养程序可以建立叶片再生体:将聊红槐增殖分化苗接种于WPM(附加6-BA 2.0mg·L-1+NAA0.05 mg·L-1+蔗糖20～60 g·L-1琼脂7.0 g·L-1)上,继代培养20 d,获得分化型试管苗;剪取叶片投入1 mg·L-1Vc无菌水浸泡1～3 min,接入WPM(附加6-BA 2.0 mg·L-1+NAA 0.1 mg·L-1+蔗糖40 g·L-1+琼脂7.0g·L-1)上,光照培养30-40 d,获得剪切口组织脱分化;环境控制(光照时间12 h,暗培养12 h,光强2000 lx,温度25℃;黑暗温度15℃,pH值5.8)下培养20～30 d,诱导出绿色愈伤组织;转接WPM培养基(附加6-BA 4.0 mg·L-1+NAA 0.05 mg·L-1+GA 2 mg·L-1+蔗糖60 g·L-1+琼脂7.0 g·L-1)上,培养后由绿色愈伤组织萌发出不定芽,再生不定芽率为89%.