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增强型绿色荧光蛋白在DH5α大肠杆菌中的表达

         

摘要

采用PCR技术从pEGFPpA-CAN克隆载体中扩增出增强型绿色荧光蛋白基因(EGFP),插入到pGEM-T easy载体中,构建pGT-EGFP重组质粒,其中的SP6启动子可用来表达EGFP蛋白.携带pGT-EGFP重组载体的DH5α大肠杆菌较普通DH5α大肠杆菌菌液略带淡绿色,在荧光显微镜下能够清晰观察该大肠杆菌的形态,带有绿色荧光.同时超声裂解携带pGT-EGFP重组载体的DH5 α大肠杆菌,提取菌体总蛋白,SDS-PAGE显示EGFP蛋白是以可溶性蛋白形式存在的,分子质量大约为30kD,与其理论值大小一致.

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