基于NLRP 3炎症小体信号通路探讨盐酸小檗碱对三叉神经痛大鼠的影响

摘要

目的:探讨盐酸小檗碱对三叉神经痛(trigeminal neuralgia,TN)大鼠模型中NOD样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体信号通路的影响以及对TN模型大鼠的保护作用.方法:采用眶下神经缩窄术制备TN大鼠模型,将造模成功的大鼠随机分为模型组和盐酸小檗碱低、中及高剂量组(25 mg/kg、50 mg/kg及100 mg/kg),每组15只.另取15只大鼠(仅分离眶下神经,不结扎)作为假手术组,假手术组和模型组大鼠予以等量0.9％氯化钠溶液灌胃,其他各组大鼠灌胃予以相应剂量的盐酸小檗碱,灌胃体积10 ml/kg,1日1次,共14 d.采用电子测痛仪测定各组大鼠在不同时间的神经颜面部支配区机械痛阈值;采用酶联免疫吸附试验检测大鼠术侧三叉神经节组织中白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平;采用实时荧光定量聚合酶链式反应检测各组大鼠术侧三叉神经节组织中降钙素基因相关肽(CGRP)、NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)及胱天蛋白酶1(caspase-1)的mRNA表达水平;采用蛋白质免疫印迹法检测大鼠术侧三叉神经节组织中CGRP、NLRP3、ASC及caspase-1的蛋白表达水平.结果:建模前3、1 d,各组大鼠机械痛阈值比较,差异均无统计学意义(P>0.05);建模后1、3 d,与假手术组比较,模型组大鼠机械痛阈值明显降低,差异有统计学意义(P0.05).建模后5～14 d,与假手术组比较,模型组大鼠机械痛阈值明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,盐酸小檗碱低、中及高剂量组大鼠机械痛阈值依次升高,呈剂量依赖性,差异均有统计学意义(P<0.05).术后第15日,与假手术组比较,模型组大鼠三叉神经节组织中IL-1β、TNF-α含量,CGRP、NLRP3、ASC及caspase-1的mRNA、蛋白表达水平均明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,盐酸小檗碱低、中及高剂量组大鼠三叉神经节组织中IL-1β、TNF-α含量,CGRP、NLRP3、ASC及caspase-1的mRNA、蛋白表达水平依次降低,呈剂量依赖性,差异均有统计学意义(P<0.05).结论:盐酸小檗碱可能通过下调NLRP3炎症小体信号通路减少炎症因子释放,降低术侧三叉神经节组织中CGRP表达水平,提高神经面部感觉区域的机械痛阈值,从而减轻TN对大鼠的损伤作用.