卵巢子宫内膜异位囊肿囊液中外泌体的提取与鉴定方法研究

摘要

目的提取鉴定卵巢子宫内膜异位囊肿囊液中的外泌体。方法收集2020年1月-2020年3月深圳市妇幼保健院卵巢子宫内膜异位症患者的囊肿囊液,对囊肿囊液标本随机采用改良的聚乙二醇(PEG)沉淀法和超高速离心法两种方法离心制备外泌体重悬液,纳米粒径追踪仪(NTA)检测提取外泌体质量,透射扫描电镜(TEM)检测外泌体形态,采集图像分析,比较两种方法的差异。Western Blot法检验外泌体标志性蛋白,以成像仪记录结果。结果采用改良PFG沉淀法在子宫内膜异位症囊肿中可以提取直径范围158.6+59.6 nm的胞外囊泡,经透射电镜观察确定为外泌体,外泌体特异性膜蛋白CD9和TSG101呈阳性表达。结论改良PEG沉淀法能够从卵巢囊肿积液中分离提取较高浓度的外泌体,为进一步后续实验研究打下基础。