人生长激素基因在昆虫细胞中的表达

摘要

近年发展起来的昆虫细胞－杆状病毒基因工程系统具有良好的优越性：（1）表达产量高，（2）产物的免疫原性、功能性类似于天然产物，（3）适用于悬及无血清培养。本实验中，将外源基因hGH克隆至质粒pVL1393，形成转移载体pVL1393／hGH（Fig.1&2)。与昆虫核多体病毒AcNPV基因组DNA转染秋粘虫细胞Sf9（Fig.3)，pV1393／hGH与AcNPV基因组DNA发生同源重组，取代多角体蛋白基因。经空斑分析纯化得到不含多角体，单一表达的重组病毒rAcVhGH(Fig.4)，感染滴度达到2．03×10^8PUF/mL。经反复实验，10^5细胞／mL感染6－7天后收获培养上清液，可得到表达量为40μg/mL的hGH蛋白（Fig.5,6&7)。