嗅鞘细胞移植对脊髓损伤大鼠Wnt/β-catenin信号分子影响

摘要

目的探讨嗅鞘细胞(olfactory ensheathing cells,OECs)移植后大鼠脊髓组织不同时期Wnt信号分子Wnt-1、β-catenin、GSK-3β、c-myc在损伤部位脊髓的表达变化。方法乳鼠嗅球制备OECs,90只成年雄性SD大鼠随机分为3组,以脊髓T_(10)节段为中心,大鼠脊髓损伤模型制备采用Allens’打击法。空白组:T_(9-11)椎板去除;损伤组:T_(10)脊髓损伤;移植组:T_(10)脊髓损伤,OECs移植。分别于术后1、3、5、7、14 d,每组各取3只大鼠,取以损伤区为中心上下1.5 cm范围内(空白组取椎板去除部位)的脊髓组织,提取总RNA,采用定量聚合酶链反应(quantitative polymerasechain reaction,q PCR)检测脊髓组织中Wnt-1、β-catenin、GSK-3β、c-myc的表达量;术前及术后第7天、第14天观察BBB评分,术后第7天做免疫组化,观察脊髓结构变化。结果移植7 d和14 d后,移植组运动功能评分(bassobeattie bresnahan,BBB)高于损伤组,差异有统计学意义(P<0.01)。q PCR结果显示空白组不同时间点各信号分子表达稳定,趋势较为平稳;损伤组Wnt-1、GSK-3β与c-myc总体呈下调趋势,β-catenin有小幅上升,但都呈明显抑制状态;与损伤组比较,移植组除c-myc小幅上调外,Wnt-1、β-catenin与GSK-3β均呈较高表达,明显减轻了损伤后的抑制状态。结论脊髓损伤后Wnt/β-catenin通路被抑制,经OECs移植后,大鼠运动功能明显恢复,且Wnt/β-catenin通路抑制状态明显减轻。