固相萃取-液相色谱-串联质谱法测定人血浆中卢帕他定的浓度

摘要

目的:建立人血浆中卢帕他定浓度的液相色谱-串联质谱(LC/MS/MS)检测方法。方法:以氯雷他定为内标,血浆样本经0.1 mol/L氢氧化钠碱化后用固相小柱萃取处理;分析柱为Kromasil C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm),保护柱为PhenomenexGemini C18柱(4 mm×3.0 mm,10μm),流动相为甲醇-10 mmol/L甲酸铵水溶液(85∶15);使用电喷雾离子源(ESI),正离子多反应监测(MRM)方式进行检测。结果:每个样本分析时间为5 min,血浆中内源性物质对测定无干扰,卢帕他定线性范围为0.011 9～15.000 0μg/L,回归方程Y=2.883X+0.009,r=0.999,定量下限为0.011 9μg/L。日内、日间精密度(RSD)均小于10%,卢帕他定与内标的平均回收率分别为102.0%和104.1%,平均基质效应为103.7%和106.2%,且均不存在浓度依赖性。结论:本方法特异性强,灵敏度高,测定结果可靠,适用于临床试验中血浆样本的高通量分析。