血管紧张素(1-7)抑制异丙肾上腺素诱导的H9c2心肌细胞凋亡

摘要

目的观察血管紧张素（1-7）[Ang（1-7）]对心肌细胞凋亡的影响,探讨其可能的作用机制。方法应用异丙肾上腺素（ISO）处理H9c2心肌细胞12 h建立心肌细胞凋亡模型,Ang（1-7）或PI3K抑制剂LY294002与H9c2心肌细胞共处理12 h观察对ISO诱导的心肌细胞凋亡的影响。显微镜下观察H9c2心肌细胞生长情况,采用MTS法检测各组细胞的相对细胞活性,TUNEL法检测各组细胞凋亡率。JC-1荧光探针检测线粒体膜电位,Western blot检测cleaved Caspase-3、p-Akt及Akt蛋白的表达量。结果 ISO呈浓度依赖性抑制H9c2心肌细胞的相对细胞活性,Ang（1-7）呈浓度依赖性逆转ISO诱导的H9c2心肌细胞相对活性的降低;与对照组比较,ISO组细胞凋亡率及cleaved Caspase-3蛋白表达量显著增加,线粒体膜电位和p-Akt蛋白表达量显著降低;Ang（1-7）可抑制ISO诱导的H9c2心肌细胞凋亡率的增加,减少cleaved Caspase-3蛋白的表达,增加线粒体膜电位和p-Akt蛋白表达量。LY294002预处理后Ang（1-7）对ISO诱导的H9c2心肌细胞的保护作用明显减弱,表现为心肌细胞凋亡率及cleaved Caspase-3蛋白的表达量明显增加,p-Akt蛋白表达量减少。结论 ISO能诱导H9c2心肌细胞线粒体途径的细胞凋亡,而Ang（1-7）能抑制ISO诱导的线粒体途径的细胞凋亡。PI3K/Akt信号通路可能在Ang（1-7）抑制ISO诱导的H9c2心肌细胞凋亡中起到关键作用。