siRNA干扰AEG-1对人胰腺癌AsPC-1细胞增殖和细胞周期的影响

摘要

目的探讨星形胶质细胞上调基因1(astrocyte elevated gene-1,AEG-1)表达水平对人胰腺癌细胞增殖和细胞周期的影响,研究其可能的分子机制。方法采用RNAi技术抑制As PC-1细胞中AEG-1表达,采用Western blot检测转染前后AEG-1蛋白表达情况,实验分为未转染组、脂质体组和AEG-1 si RNA转染组3组。采用MTT法和流式细胞术分析AEG-1基因沉默后对人胰腺癌As PC-1细胞生长及周期的影响。结果 Western blot检测结果显示,AEG-1 si RNA转染48 h后,As PC-1细胞中AEG-1蛋白相对灰度值为0.10±0.09,明显弱于未转染对照组的0.69±0.24和脂质体转染组的0.70±0.21(P0.05)。转染AEG-1 si RNA的As PC-1细胞其AEG-1基因表达量下降了82%。MTT法检测结果显示,AEG-1 si RNA干扰As PC-1细胞后,AEG-1 si RNA干扰组As PC-1细胞生长减慢(P<0.05)。FCM法检测结果显示,AEG-1基因沉默后,与未转染对照组和脂质体转染组相比,G_0/G_1期细胞的比例明显升高(P<0.05),S期的比例显著下降(均P<0.05)。结论 RNA干扰AEG-1基因表达后可明显抑制人胰腺癌As PC-1细胞增殖,且其抑制增殖作用与改变细胞周期的分布有关。