腺病毒介导TFPI基因转染诱导血管平滑肌细胞凋亡机制的探讨

摘要

目的研究组织因子途径抑制物(TFPI)基因转染对大鼠血管平滑肌细胞凋亡通路的影响,探讨TFPI诱导细胞凋亡的机制。方法将含有人TFPI基因的重组腺病毒或含β-半乳糖苷酶(LacZ)基因的重组腺病毒或DMEM在体外分别转染大鼠血管平滑肌细胞,用ELISA方法检测转染后平滑肌细胞中TFPI蛋白的表达,Western blot方法测定基因转染后不同时间点细胞中JAK-2、p-JAK-2、STAT-3、p-STAT-3以及cyclinD1的表达。结果基因转染后1天在血管平滑肌细胞中检测到TFPI蛋白的表达,而峰值出现在第3天;基因转染后3、5、7天,各组JAK-2和STAT-3的表达无明显差异(P>0.05),而TFPI组p-JAK-2、p-STAT-3以及cyclinD1的表达与对照组相比明显减少(P<0.05),且具有明显的时间依赖性。结论 TFPI可能通过抑制JAK-2/STAT-3通路来发挥诱导平滑肌细胞凋亡的作用,从而抑制再狭窄发生。