RP-HPLC荧光法同时检测喜树组织CPT和HCPT的含量

摘要

建立高效液相色谱荧光法同时测定喜树组织中喜树碱(CPT)和10-羟基喜树碱(HCPT)含量的方法。使用XTerra RP18柱(5μm,4.6×250 mm)色谱柱,以水∶乙腈=25∶75(V/V)为流动相,流速为1.0 ml/min,30℃下检测。检测器激发波长为363 nm,发射波长为550 nm。分别检测喜树苗1月、6月、12月不同生长期的根、茎、叶和不同培养基诱导的愈伤组织中的CPT和HCPT的含量。结果表明:喜树苗中CPT含量叶>茎>根,1月期喜树苗中HCPT含量叶>根或茎,6月期和12月期喜树苗中HCPT含量根>茎>叶;培养基SH+NAA1.0 mg/L+6-BA 5.0 mg/L上诱导的喜树愈伤组织有较高的CPT和HCPT含量。此方法简单、可靠,分离效果好,专属性强,灵敏度高。