肝细胞癌候选相关基因IDD01原核表达载体的构建与表达

摘要

目的　克隆及表达肝细胞癌 (hepatocellularcarcinoma ,HCC)候选相关基因IDD0 1(InstituteofDigestiveDisease .0 1) ,研究其功能。方法　用RT PCR方法从HCC标本中扩增出IDD0 1的开放读码框 (openreadingframe ,ORF) ,将目的基因插入表达载体pMAL c2X中 ,用重组质粒转化大肠杆菌 (E .coliTBl) ,并在E .coliTBl中进行表达。用SDS -PAGE方法对表达产物进行分析。结果　扩增的ORF长度约为 770bp ;经酶切和测序分析 ,插入片段序列和阅读框架正确 ;SDS PAGE结果显示 ,目的基因表达产物的相对分子质量为 2 8× 10 3 ,融合蛋白的量占全菌总蛋白的 3 0 .4%。结论　成功构建IDD0 1的原核表达载体 ,重组质粒在E .coliTBl中能够高效表达目的基因 ,该重组子的构建为IDD0