促红细胞生成素对高糖环境诱导下体外培养心脏成纤维细胞的影响

摘要

目的探讨促红细胞生成素(EPO)对高糖环境诱导过程中体外培养的乳鼠心脏成纤维细胞(CF)增殖及其表型转化的影响。方法用乳鼠原代细胞培养CF,在促进CF细胞表型转化的过程中,选用高糖培养基进行诱导,添加EPO进行干预。将同一批CF细胞随机分为3组:对照组(5.5 mmol/L葡萄糖)、高糖组(25 mmol/L葡萄糖)、高糖+EPO组(25 mmol/L葡萄糖,20 k U/L EPO)。采用免疫组织化学法鉴定CF,酶联免疫吸附法检测Ⅰ型、Ⅲ型胶原含量,Western blot检测纤维化指标α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达。结果免疫组织化学染色结果为纤维连接蛋白、波形蛋白阳性,α-肌动蛋白阴性,证实培养的细胞为心脏成纤维细胞。与对照组比较,高糖组Ⅰ型、Ⅲ型胶原表达量都明显增加(P<0.01),而高糖+EPO组Ⅰ型、Ⅲ型胶原表达量都显著低于高糖组(P<0.01)。高糖组α-SMA表达较对照组明显增高(P<0.05),而高糖+EPO组α-SMA表达较高糖组明显降低(P<0.05)。结论高糖环境下能有效的诱导CF发生表型转化,而EPO能够逆转在高糖环境作用下诱导发生的心肌纤维化。