含不同启动子的GFP载体在不同种属的胚胎干细胞系中的表达效率

摘要

目的:对比含不同启动子的绿色荧光蛋白(GFP)表达载体在hESC及小鼠胚胎干细胞(mESC)的表达效率,为探索ESC及其衍生细胞移植在体内的存活、迁移、分化及整合提供有力的细胞模型。方法:阳离子脂质体转染hESC及mESC ES-D3,荧光显微镜下观察阳性克隆,流式细胞术(FCM)计算不同载体pCX-hrGFP、pIRES-hrG-FP在不同种属细胞中的表达效率。结果:两种载体在mESC的表达效率分别为pCX-hrGFP(90±2.5)%,pIRES-hrGFP(0.67±0.02)%,两组间比较差异有统计学意义(P0.05)。结论:①CBA启动子引导的GFP表达效率高于CMV启动子。②同一载体在不同种属细胞内表达效率不同。