血管内皮生长因子受体KDR的靶向制剂的制备

摘要

目的 :研究从噬菌体肽库中筛选到的与血管内皮生长因子受体Ⅱ (KDR)有特异结合活性的小肽 ,做为KDR靶向药物的先导物质的应用。方法 :从噬菌体肽库中筛选能特异结合KDR的噬菌体克隆 ,挑选结合力最强的克隆测序并化学合成小肽P5 ,梯度ELISA、阻断实验和竞争结合实验测定小肽在体外与KDR的结合活性。将P5与生物素 (NHS d Biotin)、BSA化学偶联 ,ELISA法和细胞免疫组化实验检测偶联物与KDR的结合活性。结果 :化学合成的小肽P5在体外能特异结合KDR ,Kd =16 8.6nmol/L ,约是KDR与配体血管内皮生长因子 (VEGF165)亲和力的 1/30 ,P5能阻断VEGF165与KDR的结合活性 ,但不能竞争VEGF165与KDR的结合活性。将P5作为导向物质化学合成的P5 BSA Biotin ,在体外同样具有与KDR和细胞表面KDR分子结合的特性。结论 :化学合成的小肽P5有望作为先导分子 ,在以KDR为靶点的肿瘤靶向治疗中得到应用。